华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2012年
3期
253-257
,共5页
孔曼%陈娟%周洁%朱文德%万丽敏%熊宇芳%李子希
孔曼%陳娟%週潔%硃文德%萬麗敏%熊宇芳%李子希
공만%진연%주길%주문덕%만려민%웅우방%리자희
内质网应激%氧化应激%细胞凋亡%心肌细胞
內質網應激%氧化應激%細胞凋亡%心肌細胞
내질망응격%양화응격%세포조망%심기세포
目的 探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡是否与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控机制有关.方法 给予乳鼠心肌细胞高低两种浓度(500、100 μmol/L)和不同时间(0、4、8、12、24 h)过氧化氢(H2O2)刺激.采用流式细胞仪检测各组心肌细胞的凋亡率;苏木精-伊红染色法(HE)观察心肌细胞凋亡的典型形态;通过Western blot检测ERS标志蛋白p-PERK 和CHOP的表达变化.进一步采用ERS抑制剂化学伴侣PBA(4-phenylbutyric acid)抑制心肌细胞ERS,Western blot检测p-JNK、p-PERK 和CHOP蛋白的表达变化;采用流式细胞仪检测Caspase-12 和Caspase-3的活性.结果 ①低浓度H2O2可显著诱导心肌细胞凋亡,高浓度H2O2则导致心肌细胞发生坏死;100 μmol/L H2O2刺激心肌细胞8 h时其凋亡率最高.②心肌细胞发生凋亡时ERS标志蛋白p-PERK 和CHOP表达显著增高.③ERS抑制剂PBA预处理心肌细胞,可有效抑制H2O2诱导的p-PERK、CHOP表达及Caspase-3、Caspase-12活性的上调,与单纯H2O2处理组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 低浓度H2O2可通过促发ERS整合调控机制介导心肌细胞凋亡.这一结果将从ERS整合调控细胞应激的角度为心血管疾病的防治提供新思路.
目的 探討氧化應激誘導心肌細胞凋亡是否與內質網應激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的調控機製有關.方法 給予乳鼠心肌細胞高低兩種濃度(500、100 μmol/L)和不同時間(0、4、8、12、24 h)過氧化氫(H2O2)刺激.採用流式細胞儀檢測各組心肌細胞的凋亡率;囌木精-伊紅染色法(HE)觀察心肌細胞凋亡的典型形態;通過Western blot檢測ERS標誌蛋白p-PERK 和CHOP的錶達變化.進一步採用ERS抑製劑化學伴侶PBA(4-phenylbutyric acid)抑製心肌細胞ERS,Western blot檢測p-JNK、p-PERK 和CHOP蛋白的錶達變化;採用流式細胞儀檢測Caspase-12 和Caspase-3的活性.結果 ①低濃度H2O2可顯著誘導心肌細胞凋亡,高濃度H2O2則導緻心肌細胞髮生壞死;100 μmol/L H2O2刺激心肌細胞8 h時其凋亡率最高.②心肌細胞髮生凋亡時ERS標誌蛋白p-PERK 和CHOP錶達顯著增高.③ERS抑製劑PBA預處理心肌細胞,可有效抑製H2O2誘導的p-PERK、CHOP錶達及Caspase-3、Caspase-12活性的上調,與單純H2O2處理組相比差異有統計學意義(P＜0.01).結論 低濃度H2O2可通過促髮ERS整閤調控機製介導心肌細胞凋亡.這一結果將從ERS整閤調控細胞應激的角度為心血管疾病的防治提供新思路.
목적 탐토양화응격유도심기세포조망시부여내질망응격(endoplasmic reticulum stress,ERS)적조공궤제유관.방법 급여유서심기세포고저량충농도(500、100 μmol/L)화불동시간(0、4、8、12、24 h)과양화경(H2O2)자격.채용류식세포의검측각조심기세포적조망솔;소목정-이홍염색법(HE)관찰심기세포조망적전형형태;통과Western blot검측ERS표지단백p-PERK 화CHOP적표체변화.진일보채용ERS억제제화학반려PBA(4-phenylbutyric acid)억제심기세포ERS,Western blot검측p-JNK、p-PERK 화CHOP단백적표체변화;채용류식세포의검측Caspase-12 화Caspase-3적활성.결과 ①저농도H2O2가현저유도심기세포조망,고농도H2O2칙도치심기세포발생배사;100 μmol/L H2O2자격심기세포8 h시기조망솔최고.②심기세포발생조망시ERS표지단백p-PERK 화CHOP표체현저증고.③ERS억제제PBA예처리심기세포,가유효억제H2O2유도적p-PERK、CHOP표체급Caspase-3、Caspase-12활성적상조,여단순H2O2처리조상비차이유통계학의의(P＜0.01).결론 저농도H2O2가통과촉발ERS정합조공궤제개도심기세포조망.저일결과장종ERS정합조공세포응격적각도위심혈관질병적방치제공신사로.
