CAJ | 학술논문

目的:观察熊果酸对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗、摄取及细胞分化的影响,并探讨其作用机制.方法:将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,用高糖、高胰岛素联合诱导胰岛素抵抗模型.使用葡萄糖氧化酶法检测3T3-L1细胞葡萄糖消耗量,氚标葡萄糖法检测其葡萄糖摄取量,以评价模型建立情况.用四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测不同浓度熊果酸对3T3-L1脂肪细胞活力的影响以确定实验药物浓度.加入不同浓度熊果酸分组干预,用氚标葡萄糖法检测脂肪细胞葡萄糖摄取量；用油红O染色法检测3T3-L1脂肪细胞分化情况；用实时荧光定量聚合酶链反应法、蛋白质印迹法分别观察熊果酸对3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型细胞分化相关蛋白脂肪细胞脂类结合蛋白、基质金属蛋白酶1和原癌基因Cb1相关蛋白(c-Cbl-associated protein,CAP)表达的影响.结果:在成功建立胰岛素抵抗模型的基础上,使用MTT法检测细胞活力,确定熊果酸的作用浓度在4～20μmol/L.与模型组相比,低、高剂量熊果酸组(10、20 μmol/L)及罗格列酮组(5 μmol/L)葡萄糖摄取均明显升高(P＜0.01);低、高剂量熊果酸组3T3-L1脂肪细胞分化程度低干对照组和罗格列酮组.熊果酸可明显上调3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型CAP mRNA及蛋白的表达(P＜0.01).结论:熊果酸改善3T3-LI脂肪细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的同时可抑制其分化,这一机制可能与熊果酸上调脂肪细胞CAP的表达有关.
목적:관찰웅과산대3T3-L1지방세포이도소저항모형포도당소모、섭취급세포분화적영향,병탐토기작용궤제.방법:장3T3-L1전지방세포유도분화위성숙지방세포,용고당、고이도소연합유도이도소저항모형.사용포도당양화매법검측3T3-L1세포포도당소모량,천표포도당법검측기포도당섭취량,이평개모형건립정황.용사서염(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)비색법검측불동농도웅과산대3T3-L1지방세포활력적영향이학정실험약물농도.가입불동농도웅과산분조간예,용천표포도당법검측지방세포포도당섭취량；용유홍O염색법검측3T3-L1지방세포분화정황；용실시형광정량취합매련반응법、단백질인적법분별관찰웅과산대3T3-L1세포이도소저항모형세포분화상관단백지방세포지류결합단백、기질금속단백매1화원암기인Cb1상관단백(c-Cbl-associated protein,CAP)표체적영향.결과:재성공건립이도소저항모형적기출상,사용MTT법검측세포활력,학정웅과산적작용농도재4～20μmol/L.여모형조상비,저、고제량웅과산조(10、20 μmol/L)급라격렬동조(5 μmol/L)포도당섭취균명현승고(P＜0.01);저、고제량웅과산조3T3-L1지방세포분화정도저간대조조화라격렬동조.웅과산가명현상조3T3-L1세포이도소저항모형CAP mRNA급단백적표체(P＜0.01).결론:웅과산개선3T3-LI지방세포이도소저항모형당대사적동시가억제기분화,저일궤제가능여웅과산상조지방세포CAP적표체유관.