中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2013年
11期
998-1005
,共8页
韩晓光%田伟%刘波%刘亚军%徐云峰%靳培浩
韓曉光%田偉%劉波%劉亞軍%徐雲峰%靳培浩
한효광%전위%류파%류아군%서운봉%근배호
脊髓损伤%表没食子儿茶素没食子酸酯%神经营养因子%凋亡%大鼠
脊髓損傷%錶沒食子兒茶素沒食子痠酯%神經營養因子%凋亡%大鼠
척수손상%표몰식자인다소몰식자산지%신경영양인자%조망%대서
Spinal cord injury%Epigallocatechin gallate%Neurotrophic factor%Apoptosis%Rat
目的:研究经蛛网膜下腔给予表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能恢复的影响及其作用机制.方法:成年雌性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,假手术组(A组)仅切除椎板;对照组(B组)SCI后,蛛网膜下腔注射同体积载体溶液;10mg/kgEGCG治疗组(C组)SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 10mg/kg;20mg/kg EGCG治疗组(D组)SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 20mg/kg.改良Allen法(40g·cm)制作T10节段SCI模型,L4水平蛛网膜下腔注射EGCG或载体溶液.术前、术后1d、术后3d及术后1、2、3、4周进行盲法BBB评分、斜板试验;术后4周时处死大鼠,病理学检查(Luxol fast blue染色)观察脊髓损伤部位残余髓鞘情况;免疫组化及Western blot法检测胶质细胞源性营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Bcl-2和Bax的表达水平.结果:A组术前及术后各时间点BBB评分均为21分,斜板试验角度无明显变化;术后各时间点B、C组和D组BBB评分及斜板试验角度均小于A组(P<0.05);术后1d、3d时,B、C组和D组BBB评分以及斜板试验角度无统计学差异(P>0.05);术后1、2、3、4周时,C、D组的BBB评分及斜板试验角度均大于B组(P<0.05),C组的BBB评分及斜板试验角度与D组比较均无统计学差异(P>0.05).术后4周时,B、C、D组大鼠脊髓损伤部位的髓鞘残余面积均小于A组(P<0.05),C、D组明显大于B组(P<0.05),在损伤脊髓中心D组明显大于C组(P<0.05).术后4周时免疫组化检查,B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的阳性表达强于A组,C、D组的BDNF、GDNF和Bcl-2的阳性表达强于B组,Bax的阳性表达弱于B组.术后4周时Western blot法检测,B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的表达高于A组(P<0.05);C、D组的BDNF和GDNF表达明显高于B组(P<0.05),C组与D组无统计学差异(P>0.05);C、D组的Bcl-2表达明显高于B组(P<0.05),C组与D组比较无统计学差异(P>0.05);C组和D组的Bax表达明显低于B组(P<0.05),D组明显低于C组(P<0.05).结论:EGCG可有效促进大鼠SCI后的神经功能恢复,其机理可能与髓鞘的丢失减少、神经营养因子BDNF和GDNF的表达上调及细胞凋亡被抑制等有关.
目的:研究經蛛網膜下腔給予錶沒食子兒茶素沒食子痠酯(epigallocatechin gallate,EGCG)對大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)後神經功能恢複的影響及其作用機製.方法:成年雌性SD大鼠40隻,隨機分為4組,每組10隻,假手術組(A組)僅切除椎闆;對照組(B組)SCI後,蛛網膜下腔註射同體積載體溶液;10mg/kgEGCG治療組(C組)SCI後經蛛網膜下腔註射EGCG 10mg/kg;20mg/kg EGCG治療組(D組)SCI後經蛛網膜下腔註射EGCG 20mg/kg.改良Allen法(40g·cm)製作T10節段SCI模型,L4水平蛛網膜下腔註射EGCG或載體溶液.術前、術後1d、術後3d及術後1、2、3、4週進行盲法BBB評分、斜闆試驗;術後4週時處死大鼠,病理學檢查(Luxol fast blue染色)觀察脊髓損傷部位殘餘髓鞘情況;免疫組化及Western blot法檢測膠質細胞源性營養因子(GDNF)、腦源性神經營養因子(BDNF)、Bcl-2和Bax的錶達水平.結果:A組術前及術後各時間點BBB評分均為21分,斜闆試驗角度無明顯變化;術後各時間點B、C組和D組BBB評分及斜闆試驗角度均小于A組(P<0.05);術後1d、3d時,B、C組和D組BBB評分以及斜闆試驗角度無統計學差異(P>0.05);術後1、2、3、4週時,C、D組的BBB評分及斜闆試驗角度均大于B組(P<0.05),C組的BBB評分及斜闆試驗角度與D組比較均無統計學差異(P>0.05).術後4週時,B、C、D組大鼠脊髓損傷部位的髓鞘殘餘麵積均小于A組(P<0.05),C、D組明顯大于B組(P<0.05),在損傷脊髓中心D組明顯大于C組(P<0.05).術後4週時免疫組化檢查,B、C、D組的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的暘性錶達彊于A組,C、D組的BDNF、GDNF和Bcl-2的暘性錶達彊于B組,Bax的暘性錶達弱于B組.術後4週時Western blot法檢測,B、C、D組的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的錶達高于A組(P<0.05);C、D組的BDNF和GDNF錶達明顯高于B組(P<0.05),C組與D組無統計學差異(P>0.05);C、D組的Bcl-2錶達明顯高于B組(P<0.05),C組與D組比較無統計學差異(P>0.05);C組和D組的Bax錶達明顯低于B組(P<0.05),D組明顯低于C組(P<0.05).結論:EGCG可有效促進大鼠SCI後的神經功能恢複,其機理可能與髓鞘的丟失減少、神經營養因子BDNF和GDNF的錶達上調及細胞凋亡被抑製等有關.
목적:연구경주망막하강급여표몰식자인다소몰식자산지(epigallocatechin gallate,EGCG)대대서척수손상(spinal cord injury,SCI)후신경공능회복적영향급기작용궤제.방법:성년자성SD대서40지,수궤분위4조,매조10지,가수술조(A조)부절제추판;대조조(B조)SCI후,주망막하강주사동체적재체용액;10mg/kgEGCG치료조(C조)SCI후경주망막하강주사EGCG 10mg/kg;20mg/kg EGCG치료조(D조)SCI후경주망막하강주사EGCG 20mg/kg.개량Allen법(40g·cm)제작T10절단SCI모형,L4수평주망막하강주사EGCG혹재체용액.술전、술후1d、술후3d급술후1、2、3、4주진행맹법BBB평분、사판시험;술후4주시처사대서,병이학검사(Luxol fast blue염색)관찰척수손상부위잔여수초정황;면역조화급Western blot법검측효질세포원성영양인자(GDNF)、뇌원성신경영양인자(BDNF)、Bcl-2화Bax적표체수평.결과:A조술전급술후각시간점BBB평분균위21분,사판시험각도무명현변화;술후각시간점B、C조화D조BBB평분급사판시험각도균소우A조(P<0.05);술후1d、3d시,B、C조화D조BBB평분이급사판시험각도무통계학차이(P>0.05);술후1、2、3、4주시,C、D조적BBB평분급사판시험각도균대우B조(P<0.05),C조적BBB평분급사판시험각도여D조비교균무통계학차이(P>0.05).술후4주시,B、C、D조대서척수손상부위적수초잔여면적균소우A조(P<0.05),C、D조명현대우B조(P<0.05),재손상척수중심D조명현대우C조(P<0.05).술후4주시면역조화검사,B、C、D조적BDNF、GDNF、Bcl-2화Bax적양성표체강우A조,C、D조적BDNF、GDNF화Bcl-2적양성표체강우B조,Bax적양성표체약우B조.술후4주시Western blot법검측,B、C、D조적BDNF、GDNF、Bcl-2화Bax적표체고우A조(P<0.05);C、D조적BDNF화GDNF표체명현고우B조(P<0.05),C조여D조무통계학차이(P>0.05);C、D조적Bcl-2표체명현고우B조(P<0.05),C조여D조비교무통계학차이(P>0.05);C조화D조적Bax표체명현저우B조(P<0.05),D조명현저우C조(P<0.05).결론:EGCG가유효촉진대서SCI후적신경공능회복,기궤리가능여수초적주실감소、신경영양인자BDNF화GDNF적표체상조급세포조망피억제등유관.