现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2013年
11期
2404-2408
,共5页
李旭%李岩%程世孝%李雷明%孟凡贺%王立国%王君%范广宇
李旭%李巖%程世孝%李雷明%孟凡賀%王立國%王君%範廣宇
리욱%리암%정세효%리뢰명%맹범하%왕입국%왕군%범엄우
Livin%骨肉瘤%侵袭
Livin%骨肉瘤%侵襲
Livin%골육류%침습
Livin%osteosarcoma%invasion
目的:探讨凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员Livin基因在骨肉瘤发生发展以及转移中的作用.方法:联合RNA干扰和质粒重组技术构建Livin基因短发夹RNA (shRNA)表达载体,筛选稳定沉默Livin表达的克隆.四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)测定细胞增殖状况.划痕实验(Wound healing)和侵袭实验(Matrigel invasion assay)评价沉默Livin表达后细胞迁移和浸润能力的变化.免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白Cyclin D1和基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)的蛋白表达变化.结果:shRNA稳定转染的骨肉瘤U2-OS细胞中Livin mRNA和蛋白水平明显下调.与对照组相比,细胞增殖,游走和侵袭能力明显下降,并且该克隆中Cyclin D1,MMP-2和MMP-9的蛋白表达也明显减弱.结论:凋亡抑制蛋白Livin能够在体外条件下促进骨肉瘤细胞增殖和侵袭作用,这一过程可能与Cyclin D1和MMP-2,9的表达增强有关.
目的:探討凋亡抑製蛋白(IAP)傢族成員Livin基因在骨肉瘤髮生髮展以及轉移中的作用.方法:聯閤RNA榦擾和質粒重組技術構建Livin基因短髮夾RNA (shRNA)錶達載體,篩選穩定沉默Livin錶達的剋隆.四甲基偶氮唑藍法(MTT法)測定細胞增殖狀況.劃痕實驗(Wound healing)和侵襲實驗(Matrigel invasion assay)評價沉默Livin錶達後細胞遷移和浸潤能力的變化.免疫印跡法(Western blot)檢測細胞週期蛋白Cyclin D1和基質金屬蛋白酶-2,9(MMP-2,9)的蛋白錶達變化.結果:shRNA穩定轉染的骨肉瘤U2-OS細胞中Livin mRNA和蛋白水平明顯下調.與對照組相比,細胞增殖,遊走和侵襲能力明顯下降,併且該剋隆中Cyclin D1,MMP-2和MMP-9的蛋白錶達也明顯減弱.結論:凋亡抑製蛋白Livin能夠在體外條件下促進骨肉瘤細胞增殖和侵襲作用,這一過程可能與Cyclin D1和MMP-2,9的錶達增彊有關.
목적:탐토조망억제단백(IAP)가족성원Livin기인재골육류발생발전이급전이중적작용.방법:연합RNA간우화질립중조기술구건Livin기인단발협RNA (shRNA)표체재체,사선은정침묵Livin표체적극륭.사갑기우담서람법(MTT법)측정세포증식상황.화흔실험(Wound healing)화침습실험(Matrigel invasion assay)평개침묵Livin표체후세포천이화침윤능력적변화.면역인적법(Western blot)검측세포주기단백Cyclin D1화기질금속단백매-2,9(MMP-2,9)적단백표체변화.결과:shRNA은정전염적골육류U2-OS세포중Livin mRNA화단백수평명현하조.여대조조상비,세포증식,유주화침습능력명현하강,병차해극륭중Cyclin D1,MMP-2화MMP-9적단백표체야명현감약.결론:조망억제단백Livin능구재체외조건하촉진골육류세포증식화침습작용,저일과정가능여Cyclin D1화MMP-2,9적표체증강유관.
