色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2013年
11期
1057-1063
,共7页
马成%潘一廷%张琪%王继峰%钱小红%应万涛
馬成%潘一廷%張琪%王繼峰%錢小紅%應萬濤
마성%반일정%장기%왕계봉%전소홍%응만도
超滤辅助样品制备%亲水相互作用色谱%反相色谱%N-糖基化蛋白%N-糖
超濾輔助樣品製備%親水相互作用色譜%反相色譜%N-糖基化蛋白%N-糖
초려보조양품제비%친수상호작용색보%반상색보%N-당기화단백%N-당
filter-aided sample preparation (FASP)%hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC)%reversed-phase liquid chromatography (RPLC)%N-linked glycoprotein%N-glycan
蛋白质的N-糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多已知的血浆肿瘤诊断标志物及治疗靶标都是N-糖基化蛋白.针对血浆的糖蛋白质组研究有利于发现新的蛋白标志物.然而,血浆蛋白质浓度分布的动态范围非常宽,且同一位点上的糖链存在微观不均一性,影响了血浆中糖蛋白的鉴定效率.本文利用亲水材料ZIC-HILIC制备亲水富集柱分别对人血浆中的N-糖链和N-糖肽进行富集,并结合碱性反相色谱进行肽段的预分离和高准确度质谱分析,最终在健康人的血浆中鉴定到了299个糖基化蛋白、637个糖基化位点,并识别出31种不同的糖型.在这些鉴定到的糖基化位点中,新发现有107个N-糖基化位点(占总位点数的16.8％).本方法操作简单,可以有效富集N-糖肽和N-糖,为在血浆中寻找糖蛋白和糖链生物标志物提供了可靠的手段.
蛋白質的N-糖基化是最重要的翻譯後脩飾之一,許多已知的血漿腫瘤診斷標誌物及治療靶標都是N-糖基化蛋白.針對血漿的糖蛋白質組研究有利于髮現新的蛋白標誌物.然而,血漿蛋白質濃度分佈的動態範圍非常寬,且同一位點上的糖鏈存在微觀不均一性,影響瞭血漿中糖蛋白的鑒定效率.本文利用親水材料ZIC-HILIC製備親水富集柱分彆對人血漿中的N-糖鏈和N-糖肽進行富集,併結閤堿性反相色譜進行肽段的預分離和高準確度質譜分析,最終在健康人的血漿中鑒定到瞭299箇糖基化蛋白、637箇糖基化位點,併識彆齣31種不同的糖型.在這些鑒定到的糖基化位點中,新髮現有107箇N-糖基化位點(佔總位點數的16.8％).本方法操作簡單,可以有效富集N-糖肽和N-糖,為在血漿中尋找糖蛋白和糖鏈生物標誌物提供瞭可靠的手段.
단백질적N-당기화시최중요적번역후수식지일,허다이지적혈장종류진단표지물급치료파표도시N-당기화단백.침대혈장적당단백질조연구유리우발현신적단백표지물.연이,혈장단백질농도분포적동태범위비상관,차동일위점상적당련존재미관불균일성,영향료혈장중당단백적감정효솔.본문이용친수재료ZIC-HILIC제비친수부집주분별대인혈장중적N-당련화N-당태진행부집,병결합감성반상색보진행태단적예분리화고준학도질보분석,최종재건강인적혈장중감정도료299개당기화단백、637개당기화위점,병식별출31충불동적당형.재저사감정도적당기화위점중,신발현유107개N-당기화위점(점총위점수적16.8％).본방법조작간단,가이유효부집N-당태화N-당,위재혈장중심조당단백화당련생물표지물제공료가고적수단.
