基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
11期
1484-1488
,共5页
关克磊%阚全程%余祖江%李晶晶%司方莹%申珅%王彦芳
關剋磊%闞全程%餘祖江%李晶晶%司方瑩%申珅%王彥芳
관극뢰%감전정%여조강%리정정%사방형%신신%왕언방
氯化铵%氨转运体%RHCG%AQP8
氯化銨%氨轉運體%RHCG%AQP8
록화안%안전운체%RHCG%AQP8
ammonium chloride%ammonium transporter%RHCG%AQP8
目的 检验氯化铵是否能够特异性地刺激肝细胞,使其内部与氨离子转运有关的RHCG和AQP8基因表达发生变化.方法 培养人正常肝脏细胞(LO2)、甲状腺癌细胞(TPC-1)、卵巢癌细胞(SKOVR-3)和食管癌细胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol/L)对4种细胞作用24 h后,MTT法检测细胞的增殖；荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测LO2细胞经5、10和20 mmol/L的NH4Cl处理不同时间(6、12和24 h)后,AQP8 和RHCG基因及蛋白的表达；10 mmol/L的NH4Cl处理TPC-1、SKOVR-3和9706细胞不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达.结果 随着NH4Cl浓度的增加,氨对肝细胞LO2的增殖抑制率逐渐增加且明显大于其他细胞系；10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞6h时,RHCG基因表达量明显下调(P＜0.05),而AQP8基因的表达量在作用12 h后较对照组明显增加(P＜0.05)；10 mmol/L NH4Cl作用于L02细胞24 h时,AQP8蛋白表达量较对照组显著增加(P＜0.0.5),而RHCG无变化；相同浓度NH4C1作用其他细胞系相同时间时,AQP8和RHCG的基因和蛋白水平均未见显著性变化.结论 在氨升高的环境中,人肝细胞通过调节氨转运相关蛋白AQP8和RHCG的量来维持对氨摄取的平衡,减少氨对肝细胞的特异性损伤,在其他细胞系中无此现象.
目的 檢驗氯化銨是否能夠特異性地刺激肝細胞,使其內部與氨離子轉運有關的RHCG和AQP8基因錶達髮生變化.方法 培養人正常肝髒細胞(LO2)、甲狀腺癌細胞(TPC-1)、卵巢癌細胞(SKOVR-3)和食管癌細胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol/L)對4種細胞作用24 h後,MTT法檢測細胞的增殖；熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術檢測LO2細胞經5、10和20 mmol/L的NH4Cl處理不同時間(6、12和24 h)後,AQP8 和RHCG基因及蛋白的錶達；10 mmol/L的NH4Cl處理TPC-1、SKOVR-3和9706細胞不同時間(6、12和24 h)後,AQP8和RHCG基因及蛋白的錶達.結果 隨著NH4Cl濃度的增加,氨對肝細胞LO2的增殖抑製率逐漸增加且明顯大于其他細胞繫；10 mmol/L NH4Cl作用于LO2細胞6h時,RHCG基因錶達量明顯下調(P＜0.05),而AQP8基因的錶達量在作用12 h後較對照組明顯增加(P＜0.05)；10 mmol/L NH4Cl作用于L02細胞24 h時,AQP8蛋白錶達量較對照組顯著增加(P＜0.0.5),而RHCG無變化；相同濃度NH4C1作用其他細胞繫相同時間時,AQP8和RHCG的基因和蛋白水平均未見顯著性變化.結論 在氨升高的環境中,人肝細胞通過調節氨轉運相關蛋白AQP8和RHCG的量來維持對氨攝取的平衡,減少氨對肝細胞的特異性損傷,在其他細胞繫中無此現象.
목적 검험록화안시부능구특이성지자격간세포,사기내부여안리자전운유관적RHCG화AQP8기인표체발생변화.방법 배양인정상간장세포(LO2)、갑상선암세포(TPC-1)、란소암세포(SKOVR-3)화식관암세포(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40화50 mmol/L)대4충세포작용24 h후,MTT법검측세포적증식；형광정량PCR화단백면역인적기술검측LO2세포경5、10화20 mmol/L적NH4Cl처리불동시간(6、12화24 h)후,AQP8 화RHCG기인급단백적표체；10 mmol/L적NH4Cl처리TPC-1、SKOVR-3화9706세포불동시간(6、12화24 h)후,AQP8화RHCG기인급단백적표체.결과 수착NH4Cl농도적증가,안대간세포LO2적증식억제솔축점증가차명현대우기타세포계；10 mmol/L NH4Cl작용우LO2세포6h시,RHCG기인표체량명현하조(P＜0.05),이AQP8기인적표체량재작용12 h후교대조조명현증가(P＜0.05)；10 mmol/L NH4Cl작용우L02세포24 h시,AQP8단백표체량교대조조현저증가(P＜0.0.5),이RHCG무변화；상동농도NH4C1작용기타세포계상동시간시,AQP8화RHCG적기인화단백수평균미견현저성변화.결론 재안승고적배경중,인간세포통과조절안전운상관단백AQP8화RHCG적량래유지대안섭취적평형,감소안대간세포적특이성손상,재기타세포계중무차현상.
