化工学报
化工學報
화공학보
JOURNAL OF CHEMICAL INDUSY AND ENGINEERING (CHINA)
2013年
11期
4090-4095
,共6页
王晓君%刘新利%李秀男%马光辉%苏志国
王曉君%劉新利%李秀男%馬光輝%囌誌國
왕효군%류신리%리수남%마광휘%소지국
低场NMR%横向弛豫时间%凝胶过滤介质%逆体积排阻层析法%孔结构
低場NMR%橫嚮弛豫時間%凝膠過濾介質%逆體積排阻層析法%孔結構
저장NMR%횡향이예시간%응효과려개질%역체적배조층석법%공결구
low-field NMR%transverse relaxation time%gel filtration media%ISEC%pore structure
凝胶过滤介质在蛋白质、多糖等生物大分子的分离纯化过程中具有非常重要的作用,其中介质的孔径分布是决定分离纯化效果的关键因素.由于绝大部分凝胶过滤介质是软凝胶,因此很难用常规的方法如压汞法、低温氮吸附法等测定其孔径分布.本文探索了利用低场核磁共振测定凝胶过滤介质的孔径分布的方法.首先通过抽滤、自制琼脂糖凝胶块等实验确定了峰的归属,明确了介质孔内水、介质间隙水和自由水在核磁共振横向弛豫时间(T2)图谱上的分布范围;随后与逆体积排阻层析法(ISEC)测定的结果相对比,得出层析介质孔径和介质孔内水弛豫时间的关系;最后通过高斯正态拟合得到了介质的孔径分布.实验结果证实了低场核磁共振法测定凝胶过滤介质孔径分布的可行性.该法操作简单、测定迅速,并可以为其他层析介质孔径分布的测定提供参考.
凝膠過濾介質在蛋白質、多糖等生物大分子的分離純化過程中具有非常重要的作用,其中介質的孔徑分佈是決定分離純化效果的關鍵因素.由于絕大部分凝膠過濾介質是軟凝膠,因此很難用常規的方法如壓汞法、低溫氮吸附法等測定其孔徑分佈.本文探索瞭利用低場覈磁共振測定凝膠過濾介質的孔徑分佈的方法.首先通過抽濾、自製瓊脂糖凝膠塊等實驗確定瞭峰的歸屬,明確瞭介質孔內水、介質間隙水和自由水在覈磁共振橫嚮弛豫時間(T2)圖譜上的分佈範圍;隨後與逆體積排阻層析法(ISEC)測定的結果相對比,得齣層析介質孔徑和介質孔內水弛豫時間的關繫;最後通過高斯正態擬閤得到瞭介質的孔徑分佈.實驗結果證實瞭低場覈磁共振法測定凝膠過濾介質孔徑分佈的可行性.該法操作簡單、測定迅速,併可以為其他層析介質孔徑分佈的測定提供參攷.
응효과려개질재단백질、다당등생물대분자적분리순화과정중구유비상중요적작용,기중개질적공경분포시결정분리순화효과적관건인소.유우절대부분응효과려개질시연응효,인차흔난용상규적방법여압홍법、저온담흡부법등측정기공경분포.본문탐색료이용저장핵자공진측정응효과려개질적공경분포적방법.수선통과추려、자제경지당응효괴등실험학정료봉적귀속,명학료개질공내수、개질간극수화자유수재핵자공진횡향이예시간(T2)도보상적분포범위;수후여역체적배조층석법(ISEC)측정적결과상대비,득출층석개질공경화개질공내수이예시간적관계;최후통과고사정태의합득도료개질적공경분포.실험결과증실료저장핵자공진법측정응효과려개질공경분포적가행성.해법조작간단、측정신속,병가이위기타층석개질공경분포적측정제공삼고.
