中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2013年
5期
381-385
,共5页
喻博%洪杨%陈亮宇%刘云会
喻博%洪楊%陳亮宇%劉雲會
유박%홍양%진량우%류운회
创伤性脑损伤%神经干细胞%移植
創傷性腦損傷%神經榦細胞%移植
창상성뇌손상%신경간세포%이식
目的 探讨神经干细胞(NSCs)移植对大鼠创伤性脑损伤(TBI)整合素(integrin)表达的影响.方法 从E14大鼠胚胎分离NSCs,进行原代培养及传代培养;对NSCs进行诱导分化;采用免疫细胞化学技术对NSCs和其分化为神经元的表型进行鉴定.采用改良的Feeney法制备创伤性脑损伤模型.利用脑立体定位仪和微量注射泵进行NSCs脑内移植.采用免疫组织化学技术、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测在移植后不同时间脑组织损伤区整合素的表达.结果在培养基中,NSCs呈球团状悬浮生长,Nestin表达阳性.用含10% 胎牛血清的培养基对NSCs进行体外诱导分化后第2d,多数细胞伸出突起,以后突起逐渐延长,分支增加.分化后第5d,部分细胞呈βIII-微管蛋白阳性.整合素阳性产物主要表达于细胞膜,呈棕黄色.在对照组及移植组均可见阳性细胞表达.在不同时间点,NSCs移植组移植点及其周围脑组织中整合素的mRNA表达均显著高于对照组 (P<0.01).整合素的蛋白表达结果和mRNA表达结果相一致.结论 移植NSCs至TBI大鼠损伤脑组织,在移植点周围脑组织中整合素的表达显著增加.
目的 探討神經榦細胞(NSCs)移植對大鼠創傷性腦損傷(TBI)整閤素(integrin)錶達的影響.方法 從E14大鼠胚胎分離NSCs,進行原代培養及傳代培養;對NSCs進行誘導分化;採用免疫細胞化學技術對NSCs和其分化為神經元的錶型進行鑒定.採用改良的Feeney法製備創傷性腦損傷模型.利用腦立體定位儀和微量註射泵進行NSCs腦內移植.採用免疫組織化學技術、免疫印跡技術和RT-PCR技術檢測在移植後不同時間腦組織損傷區整閤素的錶達.結果在培養基中,NSCs呈毬糰狀懸浮生長,Nestin錶達暘性.用含10% 胎牛血清的培養基對NSCs進行體外誘導分化後第2d,多數細胞伸齣突起,以後突起逐漸延長,分支增加.分化後第5d,部分細胞呈βIII-微管蛋白暘性.整閤素暘性產物主要錶達于細胞膜,呈棕黃色.在對照組及移植組均可見暘性細胞錶達.在不同時間點,NSCs移植組移植點及其週圍腦組織中整閤素的mRNA錶達均顯著高于對照組 (P<0.01).整閤素的蛋白錶達結果和mRNA錶達結果相一緻.結論 移植NSCs至TBI大鼠損傷腦組織,在移植點週圍腦組織中整閤素的錶達顯著增加.
목적 탐토신경간세포(NSCs)이식대대서창상성뇌손상(TBI)정합소(integrin)표체적영향.방법 종E14대서배태분리NSCs,진행원대배양급전대배양;대NSCs진행유도분화;채용면역세포화학기술대NSCs화기분화위신경원적표형진행감정.채용개량적Feeney법제비창상성뇌손상모형.이용뇌입체정위의화미량주사빙진행NSCs뇌내이식.채용면역조직화학기술、면역인적기술화RT-PCR기술검측재이식후불동시간뇌조직손상구정합소적표체.결과재배양기중,NSCs정구단상현부생장,Nestin표체양성.용함10% 태우혈청적배양기대NSCs진행체외유도분화후제2d,다수세포신출돌기,이후돌기축점연장,분지증가.분화후제5d,부분세포정βIII-미관단백양성.정합소양성산물주요표체우세포막,정종황색.재대조조급이식조균가견양성세포표체.재불동시간점,NSCs이식조이식점급기주위뇌조직중정합소적mRNA표체균현저고우대조조 (P<0.01).정합소적단백표체결과화mRNA표체결과상일치.결론 이식NSCs지TBI대서손상뇌조직,재이식점주위뇌조직중정합소적표체현저증가.
