中国感染控制杂志
中國感染控製雜誌
중국감염공제잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTION CONTROL
2013年
5期
330-335,359
,共7页
陈重%刘宝兰%赖春霞%阳晋%范晓宁%余治健%邓启文
陳重%劉寶蘭%賴春霞%暘晉%範曉寧%餘治健%鄧啟文
진중%류보란%뢰춘하%양진%범효저%여치건%산계문
双歧杆菌%白细胞介素-12%柯萨奇B3病毒%心肌炎%肠道病毒属
雙歧桿菌%白細胞介素-12%柯薩奇B3病毒%心肌炎%腸道病毒屬
쌍기간균%백세포개소-12%가살기B3병독%심기염%장도병독속
目的 构建白细胞介素(IL)-12基因重组双歧杆菌(pBBADs-IL-12转化双歧杆菌),观察pBBADs-IL-12转化双歧杆菌是否对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的小鼠心肌炎具有治疗作用.方法 构建小鼠IL-12(mIL-12)基因的pBBADs-IL-12表达载体,转化双歧杆菌,体外通过酶联免疫吸附试验及Western免疫印迹验证重组双歧杆菌工程菌在L-阿拉伯糖诱导下mIL-12的表达.选取BLAB/c小鼠30只,腹腔内注射CVB3感染剂量,14 d后形成病毒性心肌炎,将感染的小鼠随机分成IL-12组、绿荧光蛋白(GFP)组及生理盐水组.IL-12组给予口服pBBADs-IL-12转化双歧杆菌;GFP组给予口服pBBADs-GFP转化双歧杆菌;生理盐水组给予腹腔注射无菌PBS(1次/d).所有小鼠均在治疗14 d后取心脏标本观察心肌病理变化,检测心肌病毒滴度,荧光定量PCR分析Th1细胞因子水平.结果 治疗14 d后,HE染色显示IL-12组小鼠心肌炎症程度较GFP组和生理盐水组明显减轻;IL-12组小鼠心脏炎症病变百分比为(18±5)%,心肌的病毒滴度为(2.89±0.18)pfu/g,显著低于GFP组[分别为(31±6)%和(4.83±0.14)pfu/g]及生理盐水组[分别为(32±9)%和(4.80±0.15)pfu/g],差异有统计学意义(均P＜0.01);IL-12组小鼠心脏γ-干扰素[(2.27±0.15)pg/mL]和肿瘤坏死因子-α[(3.05±0.17)pg/mL]水平显著高于GFP组[分别为(1.32±0.11)pg/mL和(2.37±0.16)pg/mL]及生理盐水组[分别为(1.38±0.11)pg/mL和(2.37±0.12)pg/mL],差异有统计学意义(均P<0.01).结论 此次研究成功构建了一种新型表达mIL-12的双歧杆菌载体,口服IL-12转化双歧杆菌对CVB3病毒诱导的小鼠心肌炎具有较好疗效.
目的 構建白細胞介素(IL)-12基因重組雙歧桿菌(pBBADs-IL-12轉化雙歧桿菌),觀察pBBADs-IL-12轉化雙歧桿菌是否對柯薩奇B3病毒(CVB3)誘導的小鼠心肌炎具有治療作用.方法 構建小鼠IL-12(mIL-12)基因的pBBADs-IL-12錶達載體,轉化雙歧桿菌,體外通過酶聯免疫吸附試驗及Western免疫印跡驗證重組雙歧桿菌工程菌在L-阿拉伯糖誘導下mIL-12的錶達.選取BLAB/c小鼠30隻,腹腔內註射CVB3感染劑量,14 d後形成病毒性心肌炎,將感染的小鼠隨機分成IL-12組、綠熒光蛋白(GFP)組及生理鹽水組.IL-12組給予口服pBBADs-IL-12轉化雙歧桿菌;GFP組給予口服pBBADs-GFP轉化雙歧桿菌;生理鹽水組給予腹腔註射無菌PBS(1次/d).所有小鼠均在治療14 d後取心髒標本觀察心肌病理變化,檢測心肌病毒滴度,熒光定量PCR分析Th1細胞因子水平.結果 治療14 d後,HE染色顯示IL-12組小鼠心肌炎癥程度較GFP組和生理鹽水組明顯減輕;IL-12組小鼠心髒炎癥病變百分比為(18±5)%,心肌的病毒滴度為(2.89±0.18)pfu/g,顯著低于GFP組[分彆為(31±6)%和(4.83±0.14)pfu/g]及生理鹽水組[分彆為(32±9)%和(4.80±0.15)pfu/g],差異有統計學意義(均P＜0.01);IL-12組小鼠心髒γ-榦擾素[(2.27±0.15)pg/mL]和腫瘤壞死因子-α[(3.05±0.17)pg/mL]水平顯著高于GFP組[分彆為(1.32±0.11)pg/mL和(2.37±0.16)pg/mL]及生理鹽水組[分彆為(1.38±0.11)pg/mL和(2.37±0.12)pg/mL],差異有統計學意義(均P<0.01).結論 此次研究成功構建瞭一種新型錶達mIL-12的雙歧桿菌載體,口服IL-12轉化雙歧桿菌對CVB3病毒誘導的小鼠心肌炎具有較好療效.
목적 구건백세포개소(IL)-12기인중조쌍기간균(pBBADs-IL-12전화쌍기간균),관찰pBBADs-IL-12전화쌍기간균시부대가살기B3병독(CVB3)유도적소서심기염구유치료작용.방법 구건소서IL-12(mIL-12)기인적pBBADs-IL-12표체재체,전화쌍기간균,체외통과매련면역흡부시험급Western면역인적험증중조쌍기간균공정균재L-아랍백당유도하mIL-12적표체.선취BLAB/c소서30지,복강내주사CVB3감염제량,14 d후형성병독성심기염,장감염적소서수궤분성IL-12조、록형광단백(GFP)조급생리염수조.IL-12조급여구복pBBADs-IL-12전화쌍기간균;GFP조급여구복pBBADs-GFP전화쌍기간균;생리염수조급여복강주사무균PBS(1차/d).소유소서균재치료14 d후취심장표본관찰심기병리변화,검측심기병독적도,형광정량PCR분석Th1세포인자수평.결과 치료14 d후,HE염색현시IL-12조소서심기염증정도교GFP조화생리염수조명현감경;IL-12조소서심장염증병변백분비위(18±5)%,심기적병독적도위(2.89±0.18)pfu/g,현저저우GFP조[분별위(31±6)%화(4.83±0.14)pfu/g]급생리염수조[분별위(32±9)%화(4.80±0.15)pfu/g],차이유통계학의의(균P＜0.01);IL-12조소서심장γ-간우소[(2.27±0.15)pg/mL]화종류배사인자-α[(3.05±0.17)pg/mL]수평현저고우GFP조[분별위(1.32±0.11)pg/mL화(2.37±0.16)pg/mL]급생리염수조[분별위(1.38±0.11)pg/mL화(2.37±0.12)pg/mL],차이유통계학의의(균P<0.01).결론 차차연구성공구건료일충신형표체mIL-12적쌍기간균재체,구복IL-12전화쌍기간균대CVB3병독유도적소서심기염구유교호료효.
