中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2013年
5期
31-35,后插7-后插8
,共6页
张小飞%张召军%张广州%崔晓霞%赵爽%定明%白杰英%曾林
張小飛%張召軍%張廣州%崔曉霞%趙爽%定明%白傑英%曾林
장소비%장소군%장엄주%최효하%조상%정명%백걸영%증림
产肠毒素大肠杆菌%LAMP%诊断
產腸毒素大腸桿菌%LAMP%診斷
산장독소대장간균%LAMP%진단
目的 利用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的快速、便捷、敏感、特异的检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行评价,为实验动物检测和细菌性腹泻的诊断提供技术支持.方法 根据GenBank公布的产肠毒素大肠杆菌的LT毒素基因序列(S60731.1)设计外引物和内引物进行LAMP扩增,对LAMP特异性和敏感性与PCR方法做比较.结果 建立的LAMP方法检测最低浓度为100 pg/μL,灵敏度是PCR的10倍以上并具有较高的特异性,利用该方法对27份猴腹泻样品进行LAMP和PCR方法检测,发现PCR检出率为33.3%,LAMP(60 min内)结果与PCR相同,而LAMP(90 min内)检出率为92.6%,约是PCR检出率的3倍.结论 建立了一种用于检测肠毒性大肠杆菌(ETEC)的LAMP检测方法,该方法特异性强,灵敏度高,方便快捷,适合于ETEC临床快速检测.
目的 利用環介導等溫擴增(LAMP)技術,建立產腸毒素大腸桿菌(ETEC)的快速、便捷、敏感、特異的檢測方法,併對該方法的特異性和敏感性進行評價,為實驗動物檢測和細菌性腹瀉的診斷提供技術支持.方法 根據GenBank公佈的產腸毒素大腸桿菌的LT毒素基因序列(S60731.1)設計外引物和內引物進行LAMP擴增,對LAMP特異性和敏感性與PCR方法做比較.結果 建立的LAMP方法檢測最低濃度為100 pg/μL,靈敏度是PCR的10倍以上併具有較高的特異性,利用該方法對27份猴腹瀉樣品進行LAMP和PCR方法檢測,髮現PCR檢齣率為33.3%,LAMP(60 min內)結果與PCR相同,而LAMP(90 min內)檢齣率為92.6%,約是PCR檢齣率的3倍.結論 建立瞭一種用于檢測腸毒性大腸桿菌(ETEC)的LAMP檢測方法,該方法特異性彊,靈敏度高,方便快捷,適閤于ETEC臨床快速檢測.
목적 이용배개도등온확증(LAMP)기술,건립산장독소대장간균(ETEC)적쾌속、편첩、민감、특이적검측방법,병대해방법적특이성화민감성진행평개,위실험동물검측화세균성복사적진단제공기술지지.방법 근거GenBank공포적산장독소대장간균적LT독소기인서렬(S60731.1)설계외인물화내인물진행LAMP확증,대LAMP특이성화민감성여PCR방법주비교.결과 건립적LAMP방법검측최저농도위100 pg/μL,령민도시PCR적10배이상병구유교고적특이성,이용해방법대27빈후복사양품진행LAMP화PCR방법검측,발현PCR검출솔위33.3%,LAMP(60 min내)결과여PCR상동,이LAMP(90 min내)검출솔위92.6%,약시PCR검출솔적3배.결론 건립료일충용우검측장독성대장간균(ETEC)적LAMP검측방법,해방법특이성강,령민도고,방편쾌첩,괄합우ETEC림상쾌속검측.
