中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2013年
5期
15-18,后插5-后插6
,共5页
陈立青%李长龙%郭红刚%萨晓婴%陈振文
陳立青%李長龍%郭紅剛%薩曉嬰%陳振文
진립청%리장룡%곽홍강%살효영%진진문
长爪沙鼠%肝细胞%分离%培养
長爪沙鼠%肝細胞%分離%培養
장조사서%간세포%분리%배양
目的 建立长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系.方法 以雄性长爪沙鼠为供体,采用组织消化法和Seglen两步灌流法分离肝细胞,以台盼蓝染色检测细胞得率和活率,过碘酸-希夫氏反应(PAS)鉴定肝细胞,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,并使用含有多种细胞因子的培养基维持培养.结果 组织消化法和Seglen两步灌流法平均每只长爪沙鼠可分别获得肝细胞(1.33±0.34)×107个、(3.97±1.15)×107个,细胞活率分别为(29.4±6.05)%、(80.3±4.56)%,这两种方法在细胞得率及活率方面存在显著差异.肝细胞内因有大量的糖原颗粒,经PAS染色后被染成红色.结果 表明肝细胞在贴壁后72h内,肝细胞形态发生显著变化.结论 采用胶原酶经肝门静脉灌流分离肝细胞是一种高效获得肝细胞的方法.各种细胞因子有利于维持肝细胞在体外的生长分化,长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系的建立将为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供技术支持.
目的 建立長爪沙鼠原代肝細胞分離培養體繫.方法 以雄性長爪沙鼠為供體,採用組織消化法和Seglen兩步灌流法分離肝細胞,以檯盼藍染色檢測細胞得率和活率,過碘痠-希伕氏反應(PAS)鑒定肝細胞,倒置顯微鏡觀察肝細胞形態變化,併使用含有多種細胞因子的培養基維持培養.結果 組織消化法和Seglen兩步灌流法平均每隻長爪沙鼠可分彆穫得肝細胞(1.33±0.34)×107箇、(3.97±1.15)×107箇,細胞活率分彆為(29.4±6.05)%、(80.3±4.56)%,這兩種方法在細胞得率及活率方麵存在顯著差異.肝細胞內因有大量的糖原顆粒,經PAS染色後被染成紅色.結果 錶明肝細胞在貼壁後72h內,肝細胞形態髮生顯著變化.結論 採用膠原酶經肝門靜脈灌流分離肝細胞是一種高效穫得肝細胞的方法.各種細胞因子有利于維持肝細胞在體外的生長分化,長爪沙鼠原代肝細胞分離培養體繫的建立將為肝髒相關疾病研究和防治藥物的開髮提供技術支持.
목적 건립장조사서원대간세포분리배양체계.방법 이웅성장조사서위공체,채용조직소화법화Seglen량보관류법분리간세포,이태반람염색검측세포득솔화활솔,과전산-희부씨반응(PAS)감정간세포,도치현미경관찰간세포형태변화,병사용함유다충세포인자적배양기유지배양.결과 조직소화법화Seglen량보관류법평균매지장조사서가분별획득간세포(1.33±0.34)×107개、(3.97±1.15)×107개,세포활솔분별위(29.4±6.05)%、(80.3±4.56)%,저량충방법재세포득솔급활솔방면존재현저차이.간세포내인유대량적당원과립,경PAS염색후피염성홍색.결과 표명간세포재첩벽후72h내,간세포형태발생현저변화.결론 채용효원매경간문정맥관류분리간세포시일충고효획득간세포적방법.각충세포인자유리우유지간세포재체외적생장분화,장조사서원대간세포분리배양체계적건립장위간장상관질병연구화방치약물적개발제공기술지지.
