中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2013年
5期
10-14,后插2-后插4
,共6页
吴建辉%李军%苏欣%闫晗%桂博%蒋秀蓉%孙祖越
吳建輝%李軍%囌訢%閆晗%桂博%蔣秀蓉%孫祖越
오건휘%리군%소흔%염함%계박%장수용%손조월
前列腺增生%模型%上皮细胞%原代培养%药物筛选,大鼠
前列腺增生%模型%上皮細胞%原代培養%藥物篩選,大鼠
전렬선증생%모형%상피세포%원대배양%약물사선,대서
目的 建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型.方法 无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺,称量后,剪成1 mm3小块,经Ⅱ型胶原酶消化1 h后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定.获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12 d后给予系列剂量(0.1～1000 μmol/L)的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化.结果 细胞鉴定结果显示,获取的细胞具典型上皮细胞形态特征,细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性,提示所获细胞为前列腺上皮细胞.爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72 h后,CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长,其IC50值为42.7 μM,进一步镜下观察结果显示,爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态,但能导致存活细胞数减少.他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用,镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变.结论 利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型.
目的 建立原代培養大鼠前列腺上皮細胞體外篩藥模型.方法 無菌狀態下取雄性SD大鼠腹側葉前列腺,稱量後,剪成1 mm3小塊,經Ⅱ型膠原酶消化1 h後,過濾、離心穫取前列腺細胞,接種于24孔闆培養併對細胞進行形態學和免疫組織化學鑒定.穫取的大鼠前列腺上皮細胞分彆接種于96孔闆和24孔闆培養12 d後給予繫列劑量(0.1～1000 μmol/L)的他莫昔芬和暘性藥物愛普列特處理72 h,利用CCK-8法檢測前列腺上皮細胞存活率併計算藥物IC50值,併進一步通過Giemsa染色後觀察細胞生長及形態變化.結果 細胞鑒定結果顯示,穫取的細胞具典型上皮細胞形態特徵,細胞角蛋白和前列腺特異性抗原錶達暘性,提示所穫細胞為前列腺上皮細胞.愛普列特與前列腺上皮細胞孵育72 h後,CCK-8法檢測結果顯示能夠明顯抑製前列腺上皮細胞生長,其IC50值為42.7 μM,進一步鏡下觀察結果顯示,愛普列特未明顯改變大鼠前列腺上皮細胞形態,但能導緻存活細胞數減少.他莫昔芬則對大鼠前列腺上皮細胞生長無明顯抑製作用,鏡下觀察前列腺上皮細胞數量和形態未見明顯改變.結論 利用原代培養SD大鼠前列腺上皮細胞可以成功建立前列腺增生體外篩選模型.
목적 건립원대배양대서전렬선상피세포체외사약모형.방법 무균상태하취웅성SD대서복측협전렬선,칭량후,전성1 mm3소괴,경Ⅱ형효원매소화1 h후,과려、리심획취전렬선세포,접충우24공판배양병대세포진행형태학화면역조직화학감정.획취적대서전렬선상피세포분별접충우96공판화24공판배양12 d후급여계렬제량(0.1～1000 μmol/L)적타막석분화양성약물애보렬특처리72 h,이용CCK-8법검측전렬선상피세포존활솔병계산약물IC50치,병진일보통과Giemsa염색후관찰세포생장급형태변화.결과 세포감정결과현시,획취적세포구전형상피세포형태특정,세포각단백화전렬선특이성항원표체양성,제시소획세포위전렬선상피세포.애보렬특여전렬선상피세포부육72 h후,CCK-8법검측결과현시능구명현억제전렬선상피세포생장,기IC50치위42.7 μM,진일보경하관찰결과현시,애보렬특미명현개변대서전렬선상피세포형태,단능도치존활세포수감소.타막석분칙대대서전렬선상피세포생장무명현억제작용,경하관찰전렬선상피세포수량화형태미견명현개변.결론 이용원대배양SD대서전렬선상피세포가이성공건립전렬선증생체외사선모형.
