CAJ | 학술논문

为了提高赤羽病的检测速度与效率,建立双抗夹心ELISA检测方法并进行试剂盒的研制。试验用纯化的AKV免疫BALB/c小鼠,细胞融合后用ELISA方法筛选出3株分泌抗AKV特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞(1D1、1B12和2G1),各杂交瘤细胞株均可以稳定地分泌特异性单克隆抗体,且其单克隆抗体亚型测定的结果均为IgG1、轻链均为κ链。建立DAS-ELISA检测方法,确定抗AKV单克隆抗体1B12株的最佳包被浓度为4μg/mL,多克隆抗体最佳稀释比为1∶500,二抗最佳工作浓度为1∶5000,阴性/阳性结果判定临界值为0.238,具有较好的特异性,检测极限为10-4。表明该方法及试剂盒具有较强的实用价值。
위료제고적우병적검측속도여효솔,건립쌍항협심ELISA검측방법병진행시제합적연제。시험용순화적AKV면역BALB/c소서,세포융합후용ELISA방법사선출3주분비항AKV특이성단극륭항체적잡교류세포(1D1、1B12화2G1),각잡교류세포주균가이은정지분비특이성단극륭항체,차기단극륭항체아형측정적결과균위IgG1、경련균위κ련。건립DAS-ELISA검측방법,학정항AKV단극륭항체1B12주적최가포피농도위4μg/mL,다극륭항체최가희석비위1∶500,이항최가공작농도위1∶5000,음성/양성결과판정림계치위0.238,구유교호적특이성,검측겁한위10-4。표명해방법급시제합구유교강적실용개치。