农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
7期
870-875
,共6页
金太成%张奇%赵卓%杨丽萍
金太成%張奇%趙卓%楊麗萍
금태성%장기%조탁%양려평
瞬时表达%基因沉默抑制子%蚜传辅助因子(HC-Pro)%绿色荧光蛋白(GFP)
瞬時錶達%基因沉默抑製子%蚜傳輔助因子(HC-Pro)%綠色熒光蛋白(GFP)
순시표체%기인침묵억제자%아전보조인자(HC-Pro)%록색형광단백(GFP)
Transient expression%Gene silencing suppressor%Helper component-proteinase (HC-Pro)%Green fluorescent protein (GFP)
利用植物生物反应器生产药用蛋白具有独特的发展优势,但外源基因在受体内会发生基因沉默现象而影响基因的表达.由于基因沉默抑制子能有效抑制外源基因的沉默反应,本研究利用沉默抑制子蚜传辅助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)转基因烟草有效提高了外源基因的表达.采用叶片注射法将携带表达载体p35S-30B-GFP的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)重悬液分别侵染野生型烟草(Nicotiana bentamiana)和HC-Pro转基因烟草(N.bentamiana),通过蛋白电泳检测和Western blot检测技术对绿色荧光蛋白(GFP)表达进行比较.研究结果表明,与野生型烟草Nb相比,HC-Pro转基因烟草中GFP的表达水平显著增加.本研究为基因沉默抑制子在植物生物反应器中的应用提供了理论依据.
利用植物生物反應器生產藥用蛋白具有獨特的髮展優勢,但外源基因在受體內會髮生基因沉默現象而影響基因的錶達.由于基因沉默抑製子能有效抑製外源基因的沉默反應,本研究利用沉默抑製子蚜傳輔助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)轉基因煙草有效提高瞭外源基因的錶達.採用葉片註射法將攜帶錶達載體p35S-30B-GFP的農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)重懸液分彆侵染野生型煙草(Nicotiana bentamiana)和HC-Pro轉基因煙草(N.bentamiana),通過蛋白電泳檢測和Western blot檢測技術對綠色熒光蛋白(GFP)錶達進行比較.研究結果錶明,與野生型煙草Nb相比,HC-Pro轉基因煙草中GFP的錶達水平顯著增加.本研究為基因沉默抑製子在植物生物反應器中的應用提供瞭理論依據.
이용식물생물반응기생산약용단백구유독특적발전우세,단외원기인재수체내회발생기인침묵현상이영향기인적표체.유우기인침묵억제자능유효억제외원기인적침묵반응,본연구이용침묵억제자아전보조인자(helper component-proteinase,HC-Pro)전기인연초유효제고료외원기인적표체.채용협편주사법장휴대표체재체p35S-30B-GFP적농간균(Agrobacterium tumefaciens)중현액분별침염야생형연초(Nicotiana bentamiana)화HC-Pro전기인연초(N.bentamiana),통과단백전영검측화Western blot검측기술대록색형광단백(GFP)표체진행비교.연구결과표명,여야생형연초Nb상비,HC-Pro전기인연초중GFP적표체수평현저증가.본연구위기인침묵억제자재식물생물반응기중적응용제공료이론의거.
