CAJ | 학술논문

探讨饲养层细胞接种密度对兔类ES细胞分离培养影响,筛选适合兔类ES细胞分离培养最适饲养层密度.将兔囊胚分别接种到密度为10×103、20×103和40×103个·cm-2的小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast cell,MEF)饲养层上,观察兔类ES细胞贴壁和克隆生长情况,并对所得兔类ES细胞进行碱性磷酸酶和Oct-4检测.结果表明,接种于密度为20×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(82.5％)、内细胞团(Inner cell mass,ICM)形成率(67.5％)高于接种于密度为40×103个·cm-2的饲养层上囊胚贴壁率(80.0％)、内细胞团(Inner cell mass,ICM)形成率(65.7％),差异不显著(P＞0.05)；显著高于(P＜0.05)接种于密度为10×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(55.6％)、ICM形成率(44.4％).密度为20×103个·cm-2饲养层上的兔类ES细胞F1、F2代细胞克隆率均显著高于其他两组(P＜0.05),最高已传至20代；获得的兔类ES细胞经碱性磷酸酶染色及表面抗原Oct-4表达检测均呈阳性.密度为20×103个·cm-2的MEF饲养层可更好支持兔类ES细胞体外培养.
탐토사양층세포접충밀도대토류ES세포분리배양영향,사선괄합토류ES세포분리배양최괄사양층밀도.장토낭배분별접충도밀도위10×103、20×103화40×103개·cm-2적소서배태성섬유세포(Mouse embryonic fibroblast cell,MEF)사양층상,관찰토류ES세포첩벽화극륭생장정황,병대소득토류ES세포진행감성린산매화Oct-4검측.결과표명,접충우밀도위20×103개·cm-2사양층상적낭배첩벽솔(82.5％)、내세포단(Inner cell mass,ICM)형성솔(67.5％)고우접충우밀도위40×103개·cm-2적사양층상낭배첩벽솔(80.0％)、내세포단(Inner cell mass,ICM)형성솔(65.7％),차이불현저(P＞0.05)；현저고우(P＜0.05)접충우밀도위10×103개·cm-2사양층상적낭배첩벽솔(55.6％)、ICM형성솔(44.4％).밀도위20×103개·cm-2사양층상적토류ES세포F1、F2대세포극륭솔균현저고우기타량조(P＜0.05),최고이전지20대；획득적토류ES세포경감성린산매염색급표면항원Oct-4표체검측균정양성.밀도위20×103개·cm-2적MEF사양층가경호지지토류ES세포체외배양.