畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
7期
1037-1042
,共6页
姜园园%张宝修%孙婧陶%李钟淑%方南洙
薑園園%張寶脩%孫婧陶%李鐘淑%方南洙
강완완%장보수%손청도%리종숙%방남수
褪黑素%卵母细胞%H2O2%抗氧化剂%孤雌发育
褪黑素%卵母細胞%H2O2%抗氧化劑%孤雌髮育
퇴흑소%란모세포%H2O2%항양화제%고자발육
melatonin%oocyte%H2O2%antioxidant%parthenogenetic development
通过小鼠卵母细胞自发成熟体外培养模型研究了褪黑素(MT)对外源性H2O2刺激的小鼠卵母细胞体外成熟及其孤雌发育的影响.结果表明:(1)随着H2O2剂量依赖性的增加,卵母细胞PB1的排出率下降,当增加H2O2(＞250μmol·L-1)时,显著下降(19.4％ vs.92.0％,P＜0.05)；(2)培养液中添加MT(0.1、1.0、10.0 ng·mL-1)后均能阻止H2O2的抑制作用,其中10.0 ng·mL-1的MT作用效果显著(P＜0.05)；(3)取GV期卵母细胞经H2O2(500 μmol·L-1)和MT(0.000、0.001、0.010、0.100 ng·mL-1)联合培养后孵育在2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)中,荧光显色表明,MT清除了由于H2O2引起的细胞内大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS),其中0.100 ng·mL-1的MT效果最显著(P＜0.05),极大程度的降低了氧化应激损伤,提高了成熟率；(4)统计卵母细胞孤雌激活后的发育情况,MT浓度为10-9～10-3 mol·L-1组培养的孤雌胚2-细胞发育情况无显著差异(88.2％、91.4％、91.8％、88.8％ vs.88.1％,P＞0.05),MT浓度为10-7～10-3mol· L-1组的4～8-细胞率差异显著(58.8％、73.8％、43.6％ vs.23.4％,P＜0.05),MT浓度为10-9～10-5 mol· L-1均明显促进囊胚发育(24.6％、46.6％、49.2％vs.8.0％,P＜0.05).氧化应激对卵母细胞的成熟是不利的,MT保护了卵母细胞免受氧化应激的影响,MT浓度为10-5 mol·L-1为卵母细胞孤雌发育能力的最适浓度.由此可推出MT作为细胞内的自由基清除剂,可能是提高卵母细胞和胚胎质量的重要条件之一.
通過小鼠卵母細胞自髮成熟體外培養模型研究瞭褪黑素(MT)對外源性H2O2刺激的小鼠卵母細胞體外成熟及其孤雌髮育的影響.結果錶明:(1)隨著H2O2劑量依賴性的增加,卵母細胞PB1的排齣率下降,噹增加H2O2(＞250μmol·L-1)時,顯著下降(19.4％ vs.92.0％,P＜0.05)；(2)培養液中添加MT(0.1、1.0、10.0 ng·mL-1)後均能阻止H2O2的抑製作用,其中10.0 ng·mL-1的MT作用效果顯著(P＜0.05)；(3)取GV期卵母細胞經H2O2(500 μmol·L-1)和MT(0.000、0.001、0.010、0.100 ng·mL-1)聯閤培養後孵育在2',7'-二氯熒光素二乙痠酯(DCF-DA)中,熒光顯色錶明,MT清除瞭由于H2O2引起的細胞內大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS),其中0.100 ng·mL-1的MT效果最顯著(P＜0.05),極大程度的降低瞭氧化應激損傷,提高瞭成熟率；(4)統計卵母細胞孤雌激活後的髮育情況,MT濃度為10-9～10-3 mol·L-1組培養的孤雌胚2-細胞髮育情況無顯著差異(88.2％、91.4％、91.8％、88.8％ vs.88.1％,P＞0.05),MT濃度為10-7～10-3mol· L-1組的4～8-細胞率差異顯著(58.8％、73.8％、43.6％ vs.23.4％,P＜0.05),MT濃度為10-9～10-5 mol· L-1均明顯促進囊胚髮育(24.6％、46.6％、49.2％vs.8.0％,P＜0.05).氧化應激對卵母細胞的成熟是不利的,MT保護瞭卵母細胞免受氧化應激的影響,MT濃度為10-5 mol·L-1為卵母細胞孤雌髮育能力的最適濃度.由此可推齣MT作為細胞內的自由基清除劑,可能是提高卵母細胞和胚胎質量的重要條件之一.
통과소서란모세포자발성숙체외배양모형연구료퇴흑소(MT)대외원성H2O2자격적소서란모세포체외성숙급기고자발육적영향.결과표명:(1)수착H2O2제량의뢰성적증가,란모세포PB1적배출솔하강,당증가H2O2(＞250μmol·L-1)시,현저하강(19.4％ vs.92.0％,P＜0.05)；(2)배양액중첨가MT(0.1、1.0、10.0 ng·mL-1)후균능조지H2O2적억제작용,기중10.0 ng·mL-1적MT작용효과현저(P＜0.05)；(3)취GV기란모세포경H2O2(500 μmol·L-1)화MT(0.000、0.001、0.010、0.100 ng·mL-1)연합배양후부육재2',7'-이록형광소이을산지(DCF-DA)중,형광현색표명,MT청제료유우H2O2인기적세포내대량적활성양(Reactive oxygen species,ROS),기중0.100 ng·mL-1적MT효과최현저(P＜0.05),겁대정도적강저료양화응격손상,제고료성숙솔；(4)통계란모세포고자격활후적발육정황,MT농도위10-9～10-3 mol·L-1조배양적고자배2-세포발육정황무현저차이(88.2％、91.4％、91.8％、88.8％ vs.88.1％,P＞0.05),MT농도위10-7～10-3mol· L-1조적4～8-세포솔차이현저(58.8％、73.8％、43.6％ vs.23.4％,P＜0.05),MT농도위10-9～10-5 mol· L-1균명현촉진낭배발육(24.6％、46.6％、49.2％vs.8.0％,P＜0.05).양화응격대란모세포적성숙시불리적,MT보호료란모세포면수양화응격적영향,MT농도위10-5 mol·L-1위란모세포고자발육능력적최괄농도.유차가추출MT작위세포내적자유기청제제,가능시제고란모세포화배태질량적중요조건지일.
