CAJ | 학술논문

建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备.以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件.加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12h,偶联比在4∶1～12∶1之间,偶联率在9％～20％之间,所得SP0104多抗效价达到1∶80000,MALDI-TOF质谱分析证实该抗体准确捕获目标抗原.用优化的偶联方法制备多肽SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04的免疫抗原,所得免疫血清效价均在1∶1万以上,最高可达1∶51.2万.所建碳二亚胺多肽偶联联合监测法简便实用,可提高多肽抗体制备的成功率.
건립료일충다태면역항원우련적쌍감측법,획득일충조작간편、성공솔고、괄용범위엄적탄이아알우련법,병응용우다충종류상관다태표지물적면역항원제비.이합성다태SP0104위표준품,우혈청백단백(BSA)위재체단백,탄이아알(EDC)위우련제,대가양순서、투료비、우련시간등관건조건진행고찰,채용UV화SDS-PAGE대반응산물진행연합감측,이우련비화우련솔연합평개반응조건.가양순서위다태화재체단백선혼합재가도탄이아알중,삼자질량비위1∶1∶1,우련시간위12h,우련비재4∶1～12∶1지간,우련솔재9％～20％지간,소득SP0104다항효개체도1∶80000,MALDI-TOF질보분석증실해항체준학포획목표항원.용우화적우련방법제비다태SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04적면역항원,소득면역혈청효개균재1∶1만이상,최고가체1∶51.2만.소건탄이아알다태우련연합감측법간편실용,가제고다태항체제비적성공솔.