宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2013年
6期
663-669,封2
,共8页
淀粉酶抑肽%还原型谷胱甘肽%氧化型谷胱甘肽%蛋白质折叠%α-葡萄糖苷酶抑制剂
澱粉酶抑肽%還原型穀胱甘肽%氧化型穀胱甘肽%蛋白質摺疊%α-葡萄糖苷酶抑製劑
정분매억태%환원형곡광감태%양화형곡광감태%단백질절첩%α-포도당감매억제제
tendamistat%reduced glutathione%oxidized glutathione%protein folding%α-glucosidase inhibitors
目的 观察还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)对治疗2型糖尿病药物淀粉酶抑肽(Tendamistat)小分子蛋白质氨基酸链折叠过程的影响.方法 设计四组Tendamistat的复性折叠实验,按照不同浓度及比例加入GSH与GSSG,进行Tendamistat的再氧化复性折叠反应.然后采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,分离在复性折叠过程中出现的并且用碘乙酰胺捕捉的折叠中间体及复性产物,显示其在不同实验条件下的变化,观察GSH与GSSG的浓度配比变化对Tendamistat再氧化复性折叠的影响.结果 当GSH与GSSG的实验浓度分别为1mmol·L-1和0.1 mmol·L-时,出现规范型折叠中间体和复性产物；保持GSSG的浓度0.1 mmol·L-不变,GSH的浓度在0.1mmol·L-1到10mmol·L-之间变化,可促进折叠,但若其浓度继续增加,则折叠中间体消失,折叠过程被抑制中断；当GSH的浓度为0.1mmol·L-不变时,逐渐增加GSSG的浓度,会导致出现不规范及错误折叠中间体；根据以上三组实验结果选定的1 mmol·L-GSH和0.1mmol·L-1 GSSG作为复性反应条件,可使变性还原Tendamistat在2h内再氧化重折叠复性.结论 变性还原Tendamistat的复性重折叠涉及到其4个半胱氨酸残基经再氧化形成两个二硫键的过程,GSH/GSSG氧化还原电对不可缺少,其正确复性折叠及天然二硫键的重新连接,则取决于GSH/GSSG的浓度及其比例关系,GSH与GSSG对Tendamistat复性折叠的最佳浓度为1mmol·L-1和0.1mmol·L-1,比例为10∶1.
目的 觀察還原型穀胱甘肽(GSH)與氧化型穀胱甘肽(GSSG)對治療2型糖尿病藥物澱粉酶抑肽(Tendamistat)小分子蛋白質氨基痠鏈摺疊過程的影響.方法 設計四組Tendamistat的複性摺疊實驗,按照不同濃度及比例加入GSH與GSSG,進行Tendamistat的再氧化複性摺疊反應.然後採用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,分離在複性摺疊過程中齣現的併且用碘乙酰胺捕捉的摺疊中間體及複性產物,顯示其在不同實驗條件下的變化,觀察GSH與GSSG的濃度配比變化對Tendamistat再氧化複性摺疊的影響.結果 噹GSH與GSSG的實驗濃度分彆為1mmol·L-1和0.1 mmol·L-時,齣現規範型摺疊中間體和複性產物；保持GSSG的濃度0.1 mmol·L-不變,GSH的濃度在0.1mmol·L-1到10mmol·L-之間變化,可促進摺疊,但若其濃度繼續增加,則摺疊中間體消失,摺疊過程被抑製中斷；噹GSH的濃度為0.1mmol·L-不變時,逐漸增加GSSG的濃度,會導緻齣現不規範及錯誤摺疊中間體；根據以上三組實驗結果選定的1 mmol·L-GSH和0.1mmol·L-1 GSSG作為複性反應條件,可使變性還原Tendamistat在2h內再氧化重摺疊複性.結論 變性還原Tendamistat的複性重摺疊涉及到其4箇半胱氨痠殘基經再氧化形成兩箇二硫鍵的過程,GSH/GSSG氧化還原電對不可缺少,其正確複性摺疊及天然二硫鍵的重新連接,則取決于GSH/GSSG的濃度及其比例關繫,GSH與GSSG對Tendamistat複性摺疊的最佳濃度為1mmol·L-1和0.1mmol·L-1,比例為10∶1.
목적 관찰환원형곡광감태(GSH)여양화형곡광감태(GSSG)대치료2형당뇨병약물정분매억태(Tendamistat)소분자단백질안기산련절첩과정적영향.방법 설계사조Tendamistat적복성절첩실험,안조불동농도급비례가입GSH여GSSG,진행Tendamistat적재양화복성절첩반응.연후채용비변성취병희선알응효전영적방법,분리재복성절첩과정중출현적병차용전을선알포착적절첩중간체급복성산물,현시기재불동실험조건하적변화,관찰GSH여GSSG적농도배비변화대Tendamistat재양화복성절첩적영향.결과 당GSH여GSSG적실험농도분별위1mmol·L-1화0.1 mmol·L-시,출현규범형절첩중간체화복성산물；보지GSSG적농도0.1 mmol·L-불변,GSH적농도재0.1mmol·L-1도10mmol·L-지간변화,가촉진절첩,단약기농도계속증가,칙절첩중간체소실,절첩과정피억제중단；당GSH적농도위0.1mmol·L-불변시,축점증가GSSG적농도,회도치출현불규범급착오절첩중간체；근거이상삼조실험결과선정적1 mmol·L-GSH화0.1mmol·L-1 GSSG작위복성반응조건,가사변성환원Tendamistat재2h내재양화중절첩복성.결론 변성환원Tendamistat적복성중절첩섭급도기4개반광안산잔기경재양화형성량개이류건적과정,GSH/GSSG양화환원전대불가결소,기정학복성절첩급천연이류건적중신련접,칙취결우GSH/GSSG적농도급기비례관계,GSH여GSSG대Tendamistat복성절첩적최가농도위1mmol·L-1화0.1mmol·L-1,비례위10∶1.
