基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
8期
1059-1064
,共6页
袁音%朱鹏立%林帆%余惠珍
袁音%硃鵬立%林帆%餘惠珍
원음%주붕립%림범%여혜진
吡哆胺%血管紧张素Ⅱ%糖基化终末产物%细胞凋亡%纤维化
吡哆胺%血管緊張素Ⅱ%糖基化終末產物%細胞凋亡%纖維化
필치알%혈관긴장소Ⅱ%당기화종말산물%세포조망%섬유화
pyridoxamine%angiotensin%advanced glycation end products%apoptosis%fibrosis
目的 探讨吡哆胺对人近曲肾小管上皮HK-2细胞凋亡及纤维化因子表达的影响及其作用机制.方法 以吡哆胺(P)和替米沙坦(T)分别干预血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用的HK-2细胞,分为对照组、AngⅡ(10-6 mol/L)组、AngⅡ分别加T(10-5 mol/L)组、P(0.01、0.1、1和10 mmol/L)、T+P(1 mmol/L)组,采用MTT法检测细胞存活率,Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡,流式细胞术分析活性氧簇(ROS)水平,ELISA检测细胞上清液晚期糖基化终末产物(AGEs)浓度,real-time PCR检测糖基化终末产物受体(RAGE)、TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA表达,West-ern blot检测RAGE、TGF-β1、CTGF表达和NF-κB P65磷酸化水平.结果 与AngⅡ组相比,吡哆胺和替米沙坦均增加HK-2细胞存活率,抑制细胞早期凋亡,降低细胞上清液AGEs浓度,减少ROS生成,下调RAGE、TGF-β1、CTGF、MMP-9 mRNA/蛋白表达和NF-κB P65磷酸化水平(均P＜ 0.01).吡哆胺的作用较替米沙坦显著(P＜0.05或P＜0.01),合用组的作用较替米沙坦单用组显著(P＜0.01).结论 吡哆胺可能通过降低AGEs-RAGE水平、改善氧化应激以及减少NF-κB P65磷酸化,从而抑制细胞凋亡并下调纤维化分子表达.
目的 探討吡哆胺對人近麯腎小管上皮HK-2細胞凋亡及纖維化因子錶達的影響及其作用機製.方法 以吡哆胺(P)和替米沙坦(T)分彆榦預血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)作用的HK-2細胞,分為對照組、AngⅡ(10-6 mol/L)組、AngⅡ分彆加T(10-5 mol/L)組、P(0.01、0.1、1和10 mmol/L)、T+P(1 mmol/L)組,採用MTT法檢測細胞存活率,Annexin V-FITC雙染法檢測細胞凋亡,流式細胞術分析活性氧簇(ROS)水平,ELISA檢測細胞上清液晚期糖基化終末產物(AGEs)濃度,real-time PCR檢測糖基化終末產物受體(RAGE)、TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA錶達,West-ern blot檢測RAGE、TGF-β1、CTGF錶達和NF-κB P65燐痠化水平.結果 與AngⅡ組相比,吡哆胺和替米沙坦均增加HK-2細胞存活率,抑製細胞早期凋亡,降低細胞上清液AGEs濃度,減少ROS生成,下調RAGE、TGF-β1、CTGF、MMP-9 mRNA/蛋白錶達和NF-κB P65燐痠化水平(均P＜ 0.01).吡哆胺的作用較替米沙坦顯著(P＜0.05或P＜0.01),閤用組的作用較替米沙坦單用組顯著(P＜0.01).結論 吡哆胺可能通過降低AGEs-RAGE水平、改善氧化應激以及減少NF-κB P65燐痠化,從而抑製細胞凋亡併下調纖維化分子錶達.
목적 탐토필치알대인근곡신소관상피HK-2세포조망급섬유화인자표체적영향급기작용궤제.방법 이필치알(P)화체미사탄(T)분별간예혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)작용적HK-2세포,분위대조조、AngⅡ(10-6 mol/L)조、AngⅡ분별가T(10-5 mol/L)조、P(0.01、0.1、1화10 mmol/L)、T+P(1 mmol/L)조,채용MTT법검측세포존활솔,Annexin V-FITC쌍염법검측세포조망,류식세포술분석활성양족(ROS)수평,ELISA검측세포상청액만기당기화종말산물(AGEs)농도,real-time PCR검측당기화종말산물수체(RAGE)、TGF-β1、CTGF화MMP-9 mRNA표체,West-ern blot검측RAGE、TGF-β1、CTGF표체화NF-κB P65린산화수평.결과 여AngⅡ조상비,필치알화체미사탄균증가HK-2세포존활솔,억제세포조기조망,강저세포상청액AGEs농도,감소ROS생성,하조RAGE、TGF-β1、CTGF、MMP-9 mRNA/단백표체화NF-κB P65린산화수평(균P＜ 0.01).필치알적작용교체미사탄현저(P＜0.05혹P＜0.01),합용조적작용교체미사탄단용조현저(P＜0.01).결론 필치알가능통과강저AGEs-RAGE수평、개선양화응격이급감소NF-κB P65린산화,종이억제세포조망병하조섬유화분자표체.
