基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
8期
1037-1043
,共7页
魏强强%殷嫦嫦%殷明%何丁文%周荣平%梁广胜
魏彊彊%慇嫦嫦%慇明%何丁文%週榮平%樑廣勝
위강강%은항항%은명%하정문%주영평%량엄성
GDF-5%地塞米松%BMSCs%分化%类髓核样细胞
GDF-5%地塞米鬆%BMSCs%分化%類髓覈樣細胞
GDF-5%지새미송%BMSCs%분화%류수핵양세포
GDF-5%dexamethasone%BMSCs%differentiation%NP-like cells
目的 探讨GDF-5联合地塞米松诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向类髓核样细胞分化潜能及其表型的改变.方法 用全骨髓贴壁法及序贯酶消化法分别分离培养大鼠BMSCs和髓核细胞(NPCs),均取P3代细胞分为1)对照组,2)BMSCs+ Dex组3)BMSCs+ GDF-5组4)BMSCs+ Dex+ GDF-5组(联合诱导组)5)NPCs组.诱导培养21 d,镜下观察细胞形态及密度变化,阿辛蓝染色检测蛋白多糖,RT-PCR检测COL1、ACAN、SOX9及COL2和髓核细胞阳性基因KRT19、PAX1和FOXF1的表达.Western blot检测COL2及COL1蛋白表达.结果 BMSCs形态呈长梭型、漩涡样生长;NPCs呈球形、岛状生长的特点;诱导后BMSCs向类圆形、三角形转变,细胞体积缩小,胞质颜色与对照组相比逐渐加深;蛋白多糖分泌增加,以联合诱导效果最佳.ACAN、SOX9、COL2基因的相对表达量逐渐增高,ACAN/COL2的比例呈递增趋势,COL1的表达呈递减趋势.NPCs阳性基因KRT19、PAX1、FOXF1与对照组相比(P＜0.05).含GDF-5的诱导组COL2蛋白表达高于对照组(P＜0.05),而联合诱导组COL1蛋白的表达最少.结论 GDF-5可以诱导大鼠BMSCs向类髓核样细胞分化,且地塞米松能起到显著促进作用,为BMSCs移植治疗椎间盘退变提供了理论依据.
目的 探討GDF-5聯閤地塞米鬆誘導大鼠骨髓間充質榦細胞(BMSCs)嚮類髓覈樣細胞分化潛能及其錶型的改變.方法 用全骨髓貼壁法及序貫酶消化法分彆分離培養大鼠BMSCs和髓覈細胞(NPCs),均取P3代細胞分為1)對照組,2)BMSCs+ Dex組3)BMSCs+ GDF-5組4)BMSCs+ Dex+ GDF-5組(聯閤誘導組)5)NPCs組.誘導培養21 d,鏡下觀察細胞形態及密度變化,阿辛藍染色檢測蛋白多糖,RT-PCR檢測COL1、ACAN、SOX9及COL2和髓覈細胞暘性基因KRT19、PAX1和FOXF1的錶達.Western blot檢測COL2及COL1蛋白錶達.結果 BMSCs形態呈長梭型、漩渦樣生長;NPCs呈毬形、島狀生長的特點;誘導後BMSCs嚮類圓形、三角形轉變,細胞體積縮小,胞質顏色與對照組相比逐漸加深;蛋白多糖分泌增加,以聯閤誘導效果最佳.ACAN、SOX9、COL2基因的相對錶達量逐漸增高,ACAN/COL2的比例呈遞增趨勢,COL1的錶達呈遞減趨勢.NPCs暘性基因KRT19、PAX1、FOXF1與對照組相比(P＜0.05).含GDF-5的誘導組COL2蛋白錶達高于對照組(P＜0.05),而聯閤誘導組COL1蛋白的錶達最少.結論 GDF-5可以誘導大鼠BMSCs嚮類髓覈樣細胞分化,且地塞米鬆能起到顯著促進作用,為BMSCs移植治療椎間盤退變提供瞭理論依據.
목적 탐토GDF-5연합지새미송유도대서골수간충질간세포(BMSCs)향류수핵양세포분화잠능급기표형적개변.방법 용전골수첩벽법급서관매소화법분별분리배양대서BMSCs화수핵세포(NPCs),균취P3대세포분위1)대조조,2)BMSCs+ Dex조3)BMSCs+ GDF-5조4)BMSCs+ Dex+ GDF-5조(연합유도조)5)NPCs조.유도배양21 d,경하관찰세포형태급밀도변화,아신람염색검측단백다당,RT-PCR검측COL1、ACAN、SOX9급COL2화수핵세포양성기인KRT19、PAX1화FOXF1적표체.Western blot검측COL2급COL1단백표체.결과 BMSCs형태정장사형、선와양생장;NPCs정구형、도상생장적특점;유도후BMSCs향류원형、삼각형전변,세포체적축소,포질안색여대조조상비축점가심;단백다당분비증가,이연합유도효과최가.ACAN、SOX9、COL2기인적상대표체량축점증고,ACAN/COL2적비례정체증추세,COL1적표체정체감추세.NPCs양성기인KRT19、PAX1、FOXF1여대조조상비(P＜0.05).함GDF-5적유도조COL2단백표체고우대조조(P＜0.05),이연합유도조COL1단백적표체최소.결론 GDF-5가이유도대서BMSCs향류수핵양세포분화,차지새미송능기도현저촉진작용,위BMSCs이식치료추간반퇴변제공료이론의거.
