福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
6期
517-521
,共5页
李素一%吴唯维%李盼%柯翎%许斌福%林晨韬%林天龙%陈叙
李素一%吳唯維%李盼%柯翎%許斌福%林晨韜%林天龍%陳敘
리소일%오유유%리반%가령%허빈복%림신도%림천룡%진서
创伤弧菌%外膜蛋白OmpU%克隆%原核表达%蛋白纯化%多克隆抗体
創傷弧菌%外膜蛋白OmpU%剋隆%原覈錶達%蛋白純化%多剋隆抗體
창상호균%외막단백OmpU%극륭%원핵표체%단백순화%다극륭항체
Vibrio vulnificus%outer membrane protein OmpU%cloning%prokaryotic expression%protein purification%polyclonal antibody
创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌.本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达.37℃,0.5 mmol·L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带.将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU.
創傷弧菌是導緻鰻鱺產生體錶潰瘍死亡的重要緻病菌.本研究剋隆瞭創傷弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),構建含該基因的原覈錶達載體,命名為pET-32a-ompU,將其轉化到大腸桿菌E.coli中進行融閤錶達.37℃,0.5 mmol·L-1的IPTG誘導4h,融閤蛋白rompU以可溶形式錶達,採用Ni-NTA親和層析法純化融閤蛋白,SDS-PAGE顯示純化後的rompU為與預期大小一緻的單一條帶.將純化的rompU免疫SD級大鼠,ELISA檢測收穫的多剋隆抗體血清效價,併通過Western-blot證實該OmpU多剋隆抗體可以識彆創傷弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU.
창상호균시도치만려산생체표궤양사망적중요치병균.본연구극륭료창상호균FJ03-X2주외막단백기인(ompU),구건함해기인적원핵표체재체,명명위pET-32a-ompU,장기전화도대장간균E.coli중진행융합표체.37℃,0.5 mmol·L-1적IPTG유도4h,융합단백rompU이가용형식표체,채용Ni-NTA친화층석법순화융합단백,SDS-PAGE현시순화후적rompU위여예기대소일치적단일조대.장순화적rompU면역SD급대서,ELISA검측수획적다극륭항체혈청효개,병통과Western-blot증실해OmpU다극륭항체가이식별창상호균FJ03-X2주중적천연외막단백OmpU.
