中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2013年
3期
263-266
,共4页
exendin-4类似物%EW%表达%纯化%降糖活性
exendin-4類似物%EW%錶達%純化%降糖活性
exendin-4유사물%EW%표체%순화%강당활성
Exendin-4 analogue%EW%Expression%Purification%Hypoglycemic effect
目的:探讨重组exendin-4类似物EW的基因工程制备方法及纯化后的体内降糖活性.方法:设计引物并以PCR法扩增EW基因,其N-端具有胰蛋白酶的酶切位点,C-端具有终止密码子,通过串联的方式在大肠杆菌JM109中高效表达.包涵体纯化后,通过胰蛋白酶对融合蛋白进行酶解,继而纯化,获得重组EW.测定腹腔内注射EW、exendin-4及0.9％氯化钠溶液后C57BL/6小鼠体内血糖情况.结果:将串联8个EW拷贝后的8EW基因在大肠杆菌中表达,获得的包涵体经过增溶保护后以胰蛋白酶酶切获得EW,重组EW的收率为200～250 mg/L发酵液.纯化冷冻干燥后的EW在C57BL/6小鼠体内降糖活性与exendin-4相当.结论:基因工程制备的EW是一种很有前景的抗糖尿病药物.
目的:探討重組exendin-4類似物EW的基因工程製備方法及純化後的體內降糖活性.方法:設計引物併以PCR法擴增EW基因,其N-耑具有胰蛋白酶的酶切位點,C-耑具有終止密碼子,通過串聯的方式在大腸桿菌JM109中高效錶達.包涵體純化後,通過胰蛋白酶對融閤蛋白進行酶解,繼而純化,穫得重組EW.測定腹腔內註射EW、exendin-4及0.9％氯化鈉溶液後C57BL/6小鼠體內血糖情況.結果:將串聯8箇EW拷貝後的8EW基因在大腸桿菌中錶達,穫得的包涵體經過增溶保護後以胰蛋白酶酶切穫得EW,重組EW的收率為200～250 mg/L髮酵液.純化冷凍榦燥後的EW在C57BL/6小鼠體內降糖活性與exendin-4相噹.結論:基因工程製備的EW是一種很有前景的抗糖尿病藥物.
목적:탐토중조exendin-4유사물EW적기인공정제비방법급순화후적체내강당활성.방법:설계인물병이PCR법확증EW기인,기N-단구유이단백매적매절위점,C-단구유종지밀마자,통과천련적방식재대장간균JM109중고효표체.포함체순화후,통과이단백매대융합단백진행매해,계이순화,획득중조EW.측정복강내주사EW、exendin-4급0.9％록화납용액후C57BL/6소서체내혈당정황.결과:장천련8개EW고패후적8EW기인재대장간균중표체,획득적포함체경과증용보호후이이단백매매절획득EW,중조EW적수솔위200～250 mg/L발효액.순화냉동간조후적EW재C57BL/6소서체내강당활성여exendin-4상당.결론:기인공정제비적EW시일충흔유전경적항당뇨병약물.
