草食家畜
草食傢畜
초식가축
GRASS-FEEDING LIVESTOCK
2013年
3期
51-56
,共6页
无血清悬浮培养%BHK21%驯化
無血清懸浮培養%BHK21%馴化
무혈청현부배양%BHK21%순화
本研究主要探索用常规BHK21贴壁细胞(F38)驯化为适应无血清培养基的全悬浮细胞的过程并使用生物反应器放大进行了相关研究.实验表明:常规BHK21细胞通过运用相应的商品化培养基进行低血清贴壁驯化、再到低血清全悬浮驯化、最后到无血清全悬浮驯化,使细胞达到全悬浮的状态.经过四十代的传代后,细胞在无血清悬浮培养基中生长细胞数量可达3.0×106/mL以上,且形态较好,倍增时间稳定,活力在90％以上.实验中采用速降和缓降两种方法进行过渡驯化,结果表明,在贴壁状态下,细胞对缓降方式比速降方式适应性要好,细胞的形态较好,活力在90％以上.细胞从低血清悬浮到无血清悬浮过程中,两种过渡方式无明显差异,均经过了5～10代驯化,细胞就完全适应了无血清悬浮培养基.无血清悬浮细胞从液氮中复苏后,采用直线放大的形式从1.5 mL到250 mL再到5L反应器最后到650 L反应器中生长.在培养参数方面进行了摸索,最终验证用直线放大的方法是可行的.细胞数量可达4.5×106/mL左右,细胞活力在90％以上,且细胞在放大过程中,形态良好,倍增时间稳定在18h.
本研究主要探索用常規BHK21貼壁細胞(F38)馴化為適應無血清培養基的全懸浮細胞的過程併使用生物反應器放大進行瞭相關研究.實驗錶明:常規BHK21細胞通過運用相應的商品化培養基進行低血清貼壁馴化、再到低血清全懸浮馴化、最後到無血清全懸浮馴化,使細胞達到全懸浮的狀態.經過四十代的傳代後,細胞在無血清懸浮培養基中生長細胞數量可達3.0×106/mL以上,且形態較好,倍增時間穩定,活力在90％以上.實驗中採用速降和緩降兩種方法進行過渡馴化,結果錶明,在貼壁狀態下,細胞對緩降方式比速降方式適應性要好,細胞的形態較好,活力在90％以上.細胞從低血清懸浮到無血清懸浮過程中,兩種過渡方式無明顯差異,均經過瞭5～10代馴化,細胞就完全適應瞭無血清懸浮培養基.無血清懸浮細胞從液氮中複囌後,採用直線放大的形式從1.5 mL到250 mL再到5L反應器最後到650 L反應器中生長.在培養參數方麵進行瞭摸索,最終驗證用直線放大的方法是可行的.細胞數量可達4.5×106/mL左右,細胞活力在90％以上,且細胞在放大過程中,形態良好,倍增時間穩定在18h.
본연구주요탐색용상규BHK21첩벽세포(F38)순화위괄응무혈청배양기적전현부세포적과정병사용생물반응기방대진행료상관연구.실험표명:상규BHK21세포통과운용상응적상품화배양기진행저혈청첩벽순화、재도저혈청전현부순화、최후도무혈청전현부순화,사세포체도전현부적상태.경과사십대적전대후,세포재무혈청현부배양기중생장세포수량가체3.0×106/mL이상,차형태교호,배증시간은정,활력재90％이상.실험중채용속강화완강량충방법진행과도순화,결과표명,재첩벽상태하,세포대완강방식비속강방식괄응성요호,세포적형태교호,활력재90％이상.세포종저혈청현부도무혈청현부과정중,량충과도방식무명현차이,균경과료5～10대순화,세포취완전괄응료무혈청현부배양기.무혈청현부세포종액담중복소후,채용직선방대적형식종1.5 mL도250 mL재도5L반응기최후도650 L반응기중생장.재배양삼수방면진행료모색,최종험증용직선방대적방법시가행적.세포수량가체4.5×106/mL좌우,세포활력재90％이상,차세포재방대과정중,형태량호,배증시간은정재18h.
