贵州农业科学
貴州農業科學
귀주농업과학
GUIZHOU AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
7期
129-131
,共3页
颜穗%冉雪琴%王嘉福%齐芬芳
顏穗%冉雪琴%王嘉福%齊芬芳
안수%염설금%왕가복%제분방
施氏假单胞菌%mRNA差异显示PCR技术%mRNA纯化
施氏假單胞菌%mRNA差異顯示PCR技術%mRNA純化
시씨가단포균%mRNA차이현시PCR기술%mRNA순화
Pseudomonas stutzeri%DDRT-PCR for prokaryote%mRNA purification
为丰富原核生物基因表达差异的研究方法,将应用于真核生物中的差异显示PCR方法应用于原核生物基因差异表达的研究,以1株有机磷农药乐果的降解茵施氏假单胞茵(Pseudomonas stutzer)75为研究材料,以5’末端依赖性的RNA外切酶(Terminator Exonuclease)降解其中的16S rRNA和tRNA,并用随机引物替代锚定引物,改良真核生物差异显示PCR,建立原核生物mRNA差异显示PCR的试验体系.以LB培养基培养的菌株为对照组,以无机盐培养基(乐果为唯一碳源)为试验组.结果表明:提取总RNA,通过5 ’-磷酸基团依赖的核酸外切酶降解法获得mRNA,经逆转录,用双随机引物扩增获得253个差异基因,16S rRNA、tRNA的污染较少,其中之一为硫酸盐运输蛋白基因.
為豐富原覈生物基因錶達差異的研究方法,將應用于真覈生物中的差異顯示PCR方法應用于原覈生物基因差異錶達的研究,以1株有機燐農藥樂果的降解茵施氏假單胞茵(Pseudomonas stutzer)75為研究材料,以5’末耑依賴性的RNA外切酶(Terminator Exonuclease)降解其中的16S rRNA和tRNA,併用隨機引物替代錨定引物,改良真覈生物差異顯示PCR,建立原覈生物mRNA差異顯示PCR的試驗體繫.以LB培養基培養的菌株為對照組,以無機鹽培養基(樂果為唯一碳源)為試驗組.結果錶明:提取總RNA,通過5 ’-燐痠基糰依賴的覈痠外切酶降解法穫得mRNA,經逆轉錄,用雙隨機引物擴增穫得253箇差異基因,16S rRNA、tRNA的汙染較少,其中之一為硫痠鹽運輸蛋白基因.
위봉부원핵생물기인표체차이적연구방법,장응용우진핵생물중적차이현시PCR방법응용우원핵생물기인차이표체적연구,이1주유궤린농약악과적강해인시씨가단포인(Pseudomonas stutzer)75위연구재료,이5’말단의뢰성적RNA외절매(Terminator Exonuclease)강해기중적16S rRNA화tRNA,병용수궤인물체대묘정인물,개량진핵생물차이현시PCR,건립원핵생물mRNA차이현시PCR적시험체계.이LB배양기배양적균주위대조조,이무궤염배양기(악과위유일탄원)위시험조.결과표명:제취총RNA,통과5 ’-린산기단의뢰적핵산외절매강해법획득mRNA,경역전록,용쌍수궤인물확증획득253개차이기인,16S rRNA、tRNA적오염교소,기중지일위류산염운수단백기인.
