南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
8期
1207-1212
,共6页
胡稷杰%刘亚伟%何敏毅%余斌%王钢
鬍稷傑%劉亞偉%何敏毅%餘斌%王鋼
호직걸%류아위%하민의%여빈%왕강
骨髓间充质干细胞%成骨分化%重组人骨形态发生蛋白-2%LASP1%ferritin
骨髓間充質榦細胞%成骨分化%重組人骨形態髮生蛋白-2%LASP1%ferritin
골수간충질간세포%성골분화%중조인골형태발생단백-2%LASP1%ferritin
bone marrow mesenchymal stem cells%osteogenic differentiation%recombinant human bone morphogenetic protein-2%LASP1%ferritin
目的 建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型；鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制.方法 分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组学分析成骨分化组与对照组差异表达的蛋白质,对感兴趣的蛋白质LASP1、ferritin轻链和重链表达情况用Q-PCR、Western blot进行验证.结果 成功诱导比格犬BMSCs成骨分化；蛋白质组学分析获得rhBMP-2诱导上调的蛋白质9个,下调的蛋白质11个.荧光定量PCR技术和Western blot对LASP1和ferritin表达情况进行了验证,发现rhBMP-2诱导7d后,LASP1显著下调而ferritin显著上调,与蛋白质组学结果一致.结论 LASP1在调节细胞骨架活性方面发挥重要功能,而ferritin是细胞铁离子稳态维持的重要分子,提示这两种蛋白质在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化过程中发挥重要作用.
目的 建立穩定的比格犬骨髓間充質榦細胞(BMSCs)誘導成骨分化模型；鑒定參與比格犬BMSCs細胞成骨分化過調控的蛋白質,探討其可能的調控機製.方法 分離培養比格犬BMSCs細胞,rhBMP-2誘導細胞成骨分化7d,基于蛋白質雙嚮凝膠電泳的蛋白質組學分析成骨分化組與對照組差異錶達的蛋白質,對感興趣的蛋白質LASP1、ferritin輕鏈和重鏈錶達情況用Q-PCR、Western blot進行驗證.結果 成功誘導比格犬BMSCs成骨分化；蛋白質組學分析穫得rhBMP-2誘導上調的蛋白質9箇,下調的蛋白質11箇.熒光定量PCR技術和Western blot對LASP1和ferritin錶達情況進行瞭驗證,髮現rhBMP-2誘導7d後,LASP1顯著下調而ferritin顯著上調,與蛋白質組學結果一緻.結論 LASP1在調節細胞骨架活性方麵髮揮重要功能,而ferritin是細胞鐵離子穩態維持的重要分子,提示這兩種蛋白質在rhBMP-2誘導的比格犬BMSCs成骨分化過程中髮揮重要作用.
목적 건립은정적비격견골수간충질간세포(BMSCs)유도성골분화모형；감정삼여비격견BMSCs세포성골분화과조공적단백질,탐토기가능적조공궤제.방법 분리배양비격견BMSCs세포,rhBMP-2유도세포성골분화7d,기우단백질쌍향응효전영적단백질조학분석성골분화조여대조조차이표체적단백질,대감흥취적단백질LASP1、ferritin경련화중련표체정황용Q-PCR、Western blot진행험증.결과 성공유도비격견BMSCs성골분화；단백질조학분석획득rhBMP-2유도상조적단백질9개,하조적단백질11개.형광정량PCR기술화Western blot대LASP1화ferritin표체정황진행료험증,발현rhBMP-2유도7d후,LASP1현저하조이ferritin현저상조,여단백질조학결과일치.결론 LASP1재조절세포골가활성방면발휘중요공능,이ferritin시세포철리자은태유지적중요분자,제시저량충단백질재rhBMP-2유도적비격견BMSCs성골분화과정중발휘중요작용.
