南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
8期
1141-1145
,共5页
张雪光%洪权%侯剀%王远大%吴镝%陈香美
張雪光%洪權%侯剴%王遠大%吳鏑%陳香美
장설광%홍권%후개%왕원대%오적%진향미
高尿酸血症%microRNA-155%内皮细胞
高尿痠血癥%microRNA-155%內皮細胞
고뇨산혈증%microRNA-155%내피세포
hyperuricemia%microRNA-155%endothelial ceils
目的 高尿酸血症是心血管和肾脏疾病的独立风险因素,本研究拟从miR-155人手初步探索其在高尿酸导致内皮功能障碍过程的作用机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞系HUVEC,以600 μmol/L的尿酸孵育24、48 h之后收集细胞及细胞上清液,检测eNOS的蛋白表达及上清液的NO含量；预测并利用双荧光素酶系统验证miR-155的靶基因,随后利用荧光定量PCR检测高尿酸环境中内皮细胞miR-155的表达情况,通过miR-155 inhibitor的转染检测它对内皮功能障碍的影响.结果 600 μmol/L的尿酸能诱导内皮细胞eNOS表达下降,NO分泌减少；microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告实验提示eNOS的翻译水平受miR-155直接调控；同时发现高尿酸刺激内皮细胞后miR-155的表达上调,而miR-155 inhibitor能抑制它的表达；内皮细胞转染miR-155 inhibitor之后再进行高尿酸的孵育,eNOS的表达及NO的分泌水平与单独高尿酸孵育组相比均显著升高.结论 高尿酸可通过miR-155下调eNOS表达而导致内皮细胞功能障碍.
目的 高尿痠血癥是心血管和腎髒疾病的獨立風險因素,本研究擬從miR-155人手初步探索其在高尿痠導緻內皮功能障礙過程的作用機製.方法 培養人臍靜脈內皮細胞繫HUVEC,以600 μmol/L的尿痠孵育24、48 h之後收集細胞及細胞上清液,檢測eNOS的蛋白錶達及上清液的NO含量；預測併利用雙熒光素酶繫統驗證miR-155的靶基因,隨後利用熒光定量PCR檢測高尿痠環境中內皮細胞miR-155的錶達情況,通過miR-155 inhibitor的轉染檢測它對內皮功能障礙的影響.結果 600 μmol/L的尿痠能誘導內皮細胞eNOS錶達下降,NO分泌減少；microRNA在線分析軟件及雙熒光素酶報告實驗提示eNOS的翻譯水平受miR-155直接調控；同時髮現高尿痠刺激內皮細胞後miR-155的錶達上調,而miR-155 inhibitor能抑製它的錶達；內皮細胞轉染miR-155 inhibitor之後再進行高尿痠的孵育,eNOS的錶達及NO的分泌水平與單獨高尿痠孵育組相比均顯著升高.結論 高尿痠可通過miR-155下調eNOS錶達而導緻內皮細胞功能障礙.
목적 고뇨산혈증시심혈관화신장질병적독립풍험인소,본연구의종miR-155인수초보탐색기재고뇨산도치내피공능장애과정적작용궤제.방법 배양인제정맥내피세포계HUVEC,이600 μmol/L적뇨산부육24、48 h지후수집세포급세포상청액,검측eNOS적단백표체급상청액적NO함량；예측병이용쌍형광소매계통험증miR-155적파기인,수후이용형광정량PCR검측고뇨산배경중내피세포miR-155적표체정황,통과miR-155 inhibitor적전염검측타대내피공능장애적영향.결과 600 μmol/L적뇨산능유도내피세포eNOS표체하강,NO분비감소；microRNA재선분석연건급쌍형광소매보고실험제시eNOS적번역수평수miR-155직접조공；동시발현고뇨산자격내피세포후miR-155적표체상조,이miR-155 inhibitor능억제타적표체；내피세포전염miR-155 inhibitor지후재진행고뇨산적부육,eNOS적표체급NO적분비수평여단독고뇨산부육조상비균현저승고.결론 고뇨산가통과miR-155하조eNOS표체이도치내피세포공능장애.
