华西口腔医学杂志
華西口腔醫學雜誌
화서구강의학잡지
WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY
2013年
4期
420-424
,共5页
赵华强%侯萌%魏玲玲%穆萍萍%宋晖%杨丕山
趙華彊%侯萌%魏玲玲%穆萍萍%宋暉%楊丕山
조화강%후맹%위령령%목평평%송휘%양비산
人牙龈成纤维细胞%核转录因子-κB%一氧化碳释放分子%丝裂原激活蛋白激酶
人牙齦成纖維細胞%覈轉錄因子-κB%一氧化碳釋放分子%絲裂原激活蛋白激酶
인아간성섬유세포%핵전록인자-κB%일양화탄석방분자%사렬원격활단백격매
human gingival fibroblasts%nuclear factor-κB%carbon monoxide releasing molecule%mitogen-activated protein kinase
目的 研究一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附分子表达影响的分子机制.方法 体外培养HGF,以50 ng·mL-1的TNF-α和10 ng·mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol·L-1一氧化碳释放分子-3 (CORM-3)的HGF;分别在刺激10、20 min后收集部分细胞,用Western blot法检测丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平；在刺激4h后用Western blot法检测核转录因子-κB (NF-κB)的核内表达；在部分实验中,HGF在TNF-α、IL-1β及CORM-3刺激前以鸟苷酸环化酶特异性抑制剂1H-[1,2,4]噁二唑[4,3-α]喹喔琳-1-酮(ODQ)预处理8h,刺激24h后用Western blot法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 在TNF-α和IL-1β刺激细胞10 min后,MAPK通路中p38、ERK和JNK的磷酸化水平即有明显升高,CORM-3能够明显抑制p38的磷酸化,而对ERK和JNK的磷酸化水平无明显影响；4h后,CORM-3可明显抑制NF-κB-p65的核内表达.ODQ不能改变CORM-3对TNF-α和IL-1β共同刺激下ICAM-1表达水平的影响,说明CORM-3的作用并非通过鸟苷酸环化酶系统实现.结论 一氧化碳对炎症环境下HGF黏附分子表达的抑制作用可能是通过对NF-κB的活性抑制和对MAPK p38磷酸化水平的抑制作用来实现的.
目的 研究一氧化碳對炎癥環境下人牙齦成纖維細胞(HGF)黏附分子錶達影響的分子機製.方法 體外培養HGF,以50 ng·mL-1的TNF-α和10 ng·mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol·L-1一氧化碳釋放分子-3 (CORM-3)的HGF;分彆在刺激10、20 min後收集部分細胞,用Western blot法檢測絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路中細胞外調節蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末耑激酶(JNK)和p38的燐痠化水平；在刺激4h後用Western blot法檢測覈轉錄因子-κB (NF-κB)的覈內錶達；在部分實驗中,HGF在TNF-α、IL-1β及CORM-3刺激前以鳥苷痠環化酶特異性抑製劑1H-[1,2,4]噁二唑[4,3-α]喹喔琳-1-酮(ODQ)預處理8h,刺激24h後用Western blot法檢測細胞間黏附分子-1(ICAM-1)的錶達.結果 在TNF-α和IL-1β刺激細胞10 min後,MAPK通路中p38、ERK和JNK的燐痠化水平即有明顯升高,CORM-3能夠明顯抑製p38的燐痠化,而對ERK和JNK的燐痠化水平無明顯影響；4h後,CORM-3可明顯抑製NF-κB-p65的覈內錶達.ODQ不能改變CORM-3對TNF-α和IL-1β共同刺激下ICAM-1錶達水平的影響,說明CORM-3的作用併非通過鳥苷痠環化酶繫統實現.結論 一氧化碳對炎癥環境下HGF黏附分子錶達的抑製作用可能是通過對NF-κB的活性抑製和對MAPK p38燐痠化水平的抑製作用來實現的.
목적 연구일양화탄대염증배경하인아간성섬유세포(HGF)점부분자표체영향적분자궤제.방법 체외배양HGF,이50 ng·mL-1적TNF-α화10 ng·mL-1적IL-1β자격가입혹불가입500μmol·L-1일양화탄석방분자-3 (CORM-3)적HGF;분별재자격10、20 min후수집부분세포,용Western blot법검측사렬원격활단백격매(MAPK)통로중세포외조절단백격매(ERK)、c-Jun안기말단격매(JNK)화p38적린산화수평；재자격4h후용Western blot법검측핵전록인자-κB (NF-κB)적핵내표체；재부분실험중,HGF재TNF-α、IL-1β급CORM-3자격전이조감산배화매특이성억제제1H-[1,2,4]오이서[4,3-α]규악림-1-동(ODQ)예처리8h,자격24h후용Western blot법검측세포간점부분자-1(ICAM-1)적표체.결과 재TNF-α화IL-1β자격세포10 min후,MAPK통로중p38、ERK화JNK적린산화수평즉유명현승고,CORM-3능구명현억제p38적린산화,이대ERK화JNK적린산화수평무명현영향；4h후,CORM-3가명현억제NF-κB-p65적핵내표체.ODQ불능개변CORM-3대TNF-α화IL-1β공동자격하ICAM-1표체수평적영향,설명CORM-3적작용병비통과조감산배화매계통실현.결론 일양화탄대염증배경하HGF점부분자표체적억제작용가능시통과대NF-κB적활성억제화대MAPK p38린산화수평적억제작용래실현적.
