CAJ | 학술논문

目的:观察低氧诱导因子-1α (HIF-1α)条件性基因敲除(HIF-1α cKO)小鼠膝关节软骨退变情况,以及中药复方益气化瘀方对减缓HIF-1α cKO小鼠椎间盘软骨退变的作用.方法:①将杂交繁殖获得同窝的HIF-1α+/+小鼠和HIF-1α-/-小鼠,分为HIF-1α++/+小鼠4月龄组、HIF-1α--/-小鼠4月龄组,HIF-1α+/+小鼠6月龄组、HIF-1α-/-小鼠6月龄组,每组3只.在4、6月龄依次处死相应的小鼠,取膝关节软骨,分别进行Mankin评分、藏红固绿、HE及免疫组化相关指标染色及分析,研究软骨组织的改变情况.②将2月龄HIF-1α-/-小鼠随机分为生理盐水组和益气化瘀方组,以生理盐水组小鼠作为正常对照,每组6只,共12只.灌胃给药2个月后,取各组小鼠的膝关节,分别进行Mankin评分、HE染色和藏红固绿染色,ColⅡ、Col X、VEGF、MMP-13和Sox9免疫组化染色及分析.结果:①HIF-1α-/-小鼠4月龄组膝关节软骨组织出现破损和骨化,细胞分布不均匀,软骨细胞减少.HIF-1α-/-小鼠6月龄组膝关节软骨损伤更加严重.HIF-1α-/-小鼠4月龄组椎间盘软骨中Ⅱ型胶原(ColⅡ)和Sox9表达降低,X型胶原(Col X)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、VEGF蛋白表达增加.HIF-1α-/-小鼠6月龄组ColⅡ蛋白与Sox9表达进一步降低,Col X、MMP13、VEGF蛋白表达进一步上升.②与生理盐水组比较,益气化瘀方干预后膝关节软骨部位的骨化和缺损减轻,软骨细胞分布较均匀,细胞总数增加.免疫组化染色显示,益气化瘀方组ColⅡ和Sox9蛋白的表达升高,Col X、VEGF、MMP-13蛋白表达减少.结论:HIF-1α基因敲除小鼠出现了膝关节软骨退变,并且这种退变随着小鼠增龄而加重；益气化瘀方可以减轻HIF-1α基因敲除小鼠的膝关节软骨退变.
목적:관찰저양유도인자-1α (HIF-1α)조건성기인고제(HIF-1α cKO)소서슬관절연골퇴변정황,이급중약복방익기화어방대감완HIF-1α cKO소서추간반연골퇴변적작용.방법:①장잡교번식획득동와적HIF-1α+/+소서화HIF-1α-/-소서,분위HIF-1α++/+소서4월령조、HIF-1α--/-소서4월령조,HIF-1α+/+소서6월령조、HIF-1α-/-소서6월령조,매조3지.재4、6월령의차처사상응적소서,취슬관절연골,분별진행Mankin평분、장홍고록、HE급면역조화상관지표염색급분석,연구연골조직적개변정황.②장2월령HIF-1α-/-소서수궤분위생리염수조화익기화어방조,이생리염수조소서작위정상대조,매조6지,공12지.관위급약2개월후,취각조소서적슬관절,분별진행Mankin평분、HE염색화장홍고록염색,ColⅡ、Col X、VEGF、MMP-13화Sox9면역조화염색급분석.결과:①HIF-1α-/-소서4월령조슬관절연골조직출현파손화골화,세포분포불균균,연골세포감소.HIF-1α-/-소서6월령조슬관절연골손상경가엄중.HIF-1α-/-소서4월령조추간반연골중Ⅱ형효원(ColⅡ)화Sox9표체강저,X형효원(Col X)、기질금속단백매-13(MMP-13)、VEGF단백표체증가.HIF-1α-/-소서6월령조ColⅡ단백여Sox9표체진일보강저,Col X、MMP13、VEGF단백표체진일보상승.②여생리염수조비교,익기화어방간예후슬관절연골부위적골화화결손감경,연골세포분포교균균,세포총수증가.면역조화염색현시,익기화어방조ColⅡ화Sox9단백적표체승고,Col X、VEGF、MMP-13단백표체감소.결론:HIF-1α기인고제소서출현료슬관절연골퇴변,병차저충퇴변수착소서증령이가중；익기화어방가이감경HIF-1α기인고제소서적슬관절연골퇴변.