热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2013年
7期
1282-1287
,共6页
刘小丰%彭爱红%许兰珍%邹修平%朱世平%赵晓春%陈善春
劉小豐%彭愛紅%許蘭珍%鄒脩平%硃世平%趙曉春%陳善春
류소봉%팽애홍%허란진%추수평%주세평%조효춘%진선춘
nptⅡ::mgfp5融合基因%柑橘遗传转化%GFP荧光%转化效率
nptⅡ::mgfp5融閤基因%柑橘遺傳轉化%GFP熒光%轉化效率
nptⅡ::mgfp5융합기인%감귤유전전화%GFP형광%전화효솔
npt Ⅱ::mgfp5 fusion gene%Citrus transformation%GFP fluorescent%Transformation efficiency
早期、无损伤、易于操作的阳性芽检测技术,对提高柑橘遗传转化效率是十分有利的.本文设计和构建了nptⅡ::mgfp5融合基因,通过锦橙上胚轴转化体系研究其在柑橘遗传转化中的作用.nptⅡ::mgfp5融合基因全长1 578 bp,编码525个氨基酸,作为表达载体p1301NG的选择标记和报告基因.通过农杆菌介导法转化锦橙上胚轴,再生培养1周后用体式荧光显微镜观察外植体的再生情况.在再生培养第9天时即观察到GFP荧光再生芽的形成,再生培养后10～15 d是GFP再生芽形成的高峰期.GUS染色和PCR分子检测结果证明,GFP荧光检测结果是真实可靠的.研究结果表明:nptⅡ::mgfp5融合基因能够在再生培养早期筛选到阳性转化芽,有助于提高阳性转化芽的存活率,提高柑橘遗传转化效率.
早期、無損傷、易于操作的暘性芽檢測技術,對提高柑橘遺傳轉化效率是十分有利的.本文設計和構建瞭nptⅡ::mgfp5融閤基因,通過錦橙上胚軸轉化體繫研究其在柑橘遺傳轉化中的作用.nptⅡ::mgfp5融閤基因全長1 578 bp,編碼525箇氨基痠,作為錶達載體p1301NG的選擇標記和報告基因.通過農桿菌介導法轉化錦橙上胚軸,再生培養1週後用體式熒光顯微鏡觀察外植體的再生情況.在再生培養第9天時即觀察到GFP熒光再生芽的形成,再生培養後10～15 d是GFP再生芽形成的高峰期.GUS染色和PCR分子檢測結果證明,GFP熒光檢測結果是真實可靠的.研究結果錶明:nptⅡ::mgfp5融閤基因能夠在再生培養早期篩選到暘性轉化芽,有助于提高暘性轉化芽的存活率,提高柑橘遺傳轉化效率.
조기、무손상、역우조작적양성아검측기술,대제고감귤유전전화효솔시십분유리적.본문설계화구건료nptⅡ::mgfp5융합기인,통과금등상배축전화체계연구기재감귤유전전화중적작용.nptⅡ::mgfp5융합기인전장1 578 bp,편마525개안기산,작위표체재체p1301NG적선택표기화보고기인.통과농간균개도법전화금등상배축,재생배양1주후용체식형광현미경관찰외식체적재생정황.재재생배양제9천시즉관찰도GFP형광재생아적형성,재생배양후10～15 d시GFP재생아형성적고봉기.GUS염색화PCR분자검측결과증명,GFP형광검측결과시진실가고적.연구결과표명:nptⅡ::mgfp5융합기인능구재재생배양조기사선도양성전화아,유조우제고양성전화아적존활솔,제고감귤유전전화효솔.
