山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
28期
9-12
,共4页
子宫肿瘤%FAM64A基因%细胞周期%HeLa细胞
子宮腫瘤%FAM64A基因%細胞週期%HeLa細胞
자궁종류%FAM64A기인%세포주기%HeLa세포
uterine neoplasms%FAM64A gene%cell cycle%HeLa cells
目的 观察FAM64A基因对宫颈癌细胞周期调控的影响,探讨其作为分子靶点在肿瘤治疗中的潜在价值.方法 阿霉素(ADR)处理HeLa细胞,半定量RT-PCR方法检测DNA损伤后FAM64A表达水平的变化；胸腺嘧啶脱氧核苷/诺考达唑阻断法将细胞阻断在M期,并依次释放入G1、S、G2、M期,半定量RT-PCR方法检测FAM64A在不同细胞周期中的表达情况；化学合成法合成特异性的短链siRNA,脂质体转染法将siRNA分别导入HeLa细胞,RT-PCR法检测其对FAM64A表达的抑制效果；选取特异性的FAM64A siRNA,转染入HeLa细胞,采用流式细胞仪分析FAM64A表达被抑制后对HeLa细胞周期的影响.结果 FAM64A的表达水平在ADR处理后期约24 h呈现明显下调,到48 h时表达量几乎为零.FAM64A的表达水平在G2/M期表达升高,G1、S期表达降低.半定量RT-PCR结果表明,合成的特异性短链FAM64A siRNA能高效、特异性地抑制HeLa细胞中FAM64A的表达.流式细胞分析结果表明,FAM64A表达被抑制后,细胞周期被阻滞在G1期.结论 FAM64A基因参与了宫颈癌HeLa细胞周期的表达和调控,是一个潜在的肿瘤治疗靶点.
目的 觀察FAM64A基因對宮頸癌細胞週期調控的影響,探討其作為分子靶點在腫瘤治療中的潛在價值.方法 阿黴素(ADR)處理HeLa細胞,半定量RT-PCR方法檢測DNA損傷後FAM64A錶達水平的變化；胸腺嘧啶脫氧覈苷/諾攷達唑阻斷法將細胞阻斷在M期,併依次釋放入G1、S、G2、M期,半定量RT-PCR方法檢測FAM64A在不同細胞週期中的錶達情況；化學閤成法閤成特異性的短鏈siRNA,脂質體轉染法將siRNA分彆導入HeLa細胞,RT-PCR法檢測其對FAM64A錶達的抑製效果；選取特異性的FAM64A siRNA,轉染入HeLa細胞,採用流式細胞儀分析FAM64A錶達被抑製後對HeLa細胞週期的影響.結果 FAM64A的錶達水平在ADR處理後期約24 h呈現明顯下調,到48 h時錶達量幾乎為零.FAM64A的錶達水平在G2/M期錶達升高,G1、S期錶達降低.半定量RT-PCR結果錶明,閤成的特異性短鏈FAM64A siRNA能高效、特異性地抑製HeLa細胞中FAM64A的錶達.流式細胞分析結果錶明,FAM64A錶達被抑製後,細胞週期被阻滯在G1期.結論 FAM64A基因參與瞭宮頸癌HeLa細胞週期的錶達和調控,是一箇潛在的腫瘤治療靶點.
목적 관찰FAM64A기인대궁경암세포주기조공적영향,탐토기작위분자파점재종류치료중적잠재개치.방법 아매소(ADR)처리HeLa세포,반정량RT-PCR방법검측DNA손상후FAM64A표체수평적변화；흉선밀정탈양핵감/낙고체서조단법장세포조단재M기,병의차석방입G1、S、G2、M기,반정량RT-PCR방법검측FAM64A재불동세포주기중적표체정황；화학합성법합성특이성적단련siRNA,지질체전염법장siRNA분별도입HeLa세포,RT-PCR법검측기대FAM64A표체적억제효과；선취특이성적FAM64A siRNA,전염입HeLa세포,채용류식세포의분석FAM64A표체피억제후대HeLa세포주기적영향.결과 FAM64A적표체수평재ADR처리후기약24 h정현명현하조,도48 h시표체량궤호위령.FAM64A적표체수평재G2/M기표체승고,G1、S기표체강저.반정량RT-PCR결과표명,합성적특이성단련FAM64A siRNA능고효、특이성지억제HeLa세포중FAM64A적표체.류식세포분석결과표명,FAM64A표체피억제후,세포주기피조체재G1기.결론 FAM64A기인삼여료궁경암HeLa세포주기적표체화조공,시일개잠재적종류치료파점.
