植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2013年
3期
102-107
,共6页
苹果茎沟病毒%实时荧光定量PCR%病毒检测
蘋果莖溝病毒%實時熒光定量PCR%病毒檢測
평과경구병독%실시형광정량PCR%병독검측
Apple stem grooving virus%Real-time RT-RCP%virus detection
以含有苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的苹果枝条为试材,设计扩增产物片段为176 bp的特异性引物,优化反应条件,构建标准曲线,建立了苹果茎沟病毒的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法.对该方法进行了灵敏度和重复性试验,并且利用建立的方法对受ASGV感染的苹果枝条和树叶进行定量检测.最后,比较了实时荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR检测的灵敏度.结果表明:样品的荧光定量PCR有良好的扩增曲线和溶解曲线,该方法的灵敏度可达6.8× 102拷贝/μL,检测其灵敏度是传统RT-PCR的100倍,所建立的荧光定量技术可用于田间样品中此病毒的检测,丰富了ASGV的检测手段,提高了检测灵敏度,具有较好的应用前景.
以含有蘋果莖溝病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的蘋果枝條為試材,設計擴增產物片段為176 bp的特異性引物,優化反應條件,構建標準麯線,建立瞭蘋果莖溝病毒的SYBR Green Ⅰ實時熒光定量RT-PCR檢測方法.對該方法進行瞭靈敏度和重複性試驗,併且利用建立的方法對受ASGV感染的蘋果枝條和樹葉進行定量檢測.最後,比較瞭實時熒光定量RT-PCR與常規RT-PCR檢測的靈敏度.結果錶明:樣品的熒光定量PCR有良好的擴增麯線和溶解麯線,該方法的靈敏度可達6.8× 102拷貝/μL,檢測其靈敏度是傳統RT-PCR的100倍,所建立的熒光定量技術可用于田間樣品中此病毒的檢測,豐富瞭ASGV的檢測手段,提高瞭檢測靈敏度,具有較好的應用前景.
이함유평과경구병독(Apple stem grooving virus,ASGV)적평과지조위시재,설계확증산물편단위176 bp적특이성인물,우화반응조건,구건표준곡선,건립료평과경구병독적SYBR Green Ⅰ실시형광정량RT-PCR검측방법.대해방법진행료령민도화중복성시험,병차이용건립적방법대수ASGV감염적평과지조화수협진행정량검측.최후,비교료실시형광정량RT-PCR여상규RT-PCR검측적령민도.결과표명:양품적형광정량PCR유량호적확증곡선화용해곡선,해방법적령민도가체6.8× 102고패/μL,검측기령민도시전통RT-PCR적100배,소건립적형광정량기술가용우전간양품중차병독적검측,봉부료ASGV적검측수단,제고료검측령민도,구유교호적응용전경.
