CAJ | 학술논문

建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测.利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系；在普通LAMP引物的基础上设计一对环引物,建立柑橘溃疡病菌的快速LAMP检测体系,并以多种参比菌DNA以及健康柑橘叶片基因组DNA为模板对普通LAMP和快速LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用柑橘溃疡病菌菌液和DNA溶液梯度稀释液对普通LAMP和快速LAMP检测体系的灵敏度进行了验证.普通LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25×104 cfu和2.03×10-1 ng,快速LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25 cfu和2.03×10-5ng.在特异性测试中,普通LAMP检测体系与快速LAMP检测体系均仅对柑橘溃疡病菌进行扩增,对非靶标菌和柑橘叶片基因组DNA不产生扩增,普通LAMP与快速LAMP检测体系特异性测试结果一致.快速LAMP检测体系在0.5h内就可以达到普通LAMP检测体系的扩增量,是普通LAMP检测体系反应时间的一半,大大提高了检测的效率；快速LAMP检测体系菌悬液和DNA检测灵敏度均比普通LAMP检测体系提高了10 000倍.成功地建立了柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法,为柑橘溃疡病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段.
건립감귤궤양병균적보통LAMP화쾌속LAMP검측방법,사기능응용우기층검험검역부문대병해적쾌속검측.이용감귤궤양병균기인조특유적보수구역설계LAMP인물,통과우화반응조건,건립감귤궤양병균적보통LAMP검측체계；재보통LAMP인물적기출상설계일대배인물,건립감귤궤양병균적쾌속LAMP검측체계,병이다충삼비균DNA이급건강감귤협편기인조DNA위모판대보통LAMP화쾌속LAMP검측체계적특이성진행료험증,이용감귤궤양병균균액화DNA용액제도희석액대보통LAMP화쾌속LAMP검측체계적령민도진행료험증.보통LAMP검측체계균체화DNA검측령민도분별체도료2.25×104 cfu화2.03×10-1 ng,쾌속LAMP검측체계균체화DNA검측령민도분별체도료2.25 cfu화2.03×10-5ng.재특이성측시중,보통LAMP검측체계여쾌속LAMP검측체계균부대감귤궤양병균진행확증,대비파표균화감귤협편기인조DNA불산생확증,보통LAMP여쾌속LAMP검측체계특이성측시결과일치.쾌속LAMP검측체계재0.5h내취가이체도보통LAMP검측체계적확증량,시보통LAMP검측체계반응시간적일반,대대제고료검측적효솔；쾌속LAMP검측체계균현액화DNA검측령민도균비보통LAMP검측체계제고료10 000배.성공지건립료감귤궤양병균적보통LAMP급쾌속LAMP검측방법,위감귤궤양병균적검측제공료일충신적간편、쾌속적검측수단.