哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
3期
201-204
,共4页
姜苗苗%申景岭%孙唐娜%王凤梅%王帆%白景玉%卢少玲%张烁
薑苗苗%申景嶺%孫唐娜%王鳳梅%王帆%白景玉%盧少玲%張爍
강묘묘%신경령%손당나%왕봉매%왕범%백경옥%로소령%장삭
柯萨奇病毒-腺病毒受体%C57BL/6鼠%pBiG质粒%载体构建
柯薩奇病毒-腺病毒受體%C57BL/6鼠%pBiG質粒%載體構建
가살기병독-선병독수체%C57BL/6서%pBiG질립%재체구건
CAR%C57BL/6 mice%pBiG%vector construction
目的 构建及鉴定pBiG-CAR真核表达载体.方法 提取C57BL/6胎鼠总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得CAR基因,与双酶切的pBlue质粒连接,经转化、蓝白筛选及测序鉴定pBlue-CAR载体构建成功.扩增pBlue-CAR的CAR基因,经双酶切后与pBiG质粒连接,构建pBiG-CAR真核表达载体.结果 经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因CAR条带,pBlue-CAR目标条带及pBiG-CAR目标条带.基因测序证实所检测重组质粒序列与pBiG-CAR序列完全一致.结论 克隆C57BL/6鼠CAR基因、pBlue-CAR重组质粒的构建获得成功,并初步证实pBiG-CAR真核表达载体的构建获得成功,为进一步构建可控心肌特异性CAR过表达转基因鼠提供基础.
目的 構建及鑒定pBiG-CAR真覈錶達載體.方法 提取C57BL/6胎鼠總RNA,逆轉錄閤成cDNA,經PCR擴增穫得CAR基因,與雙酶切的pBlue質粒連接,經轉化、藍白篩選及測序鑒定pBlue-CAR載體構建成功.擴增pBlue-CAR的CAR基因,經雙酶切後與pBiG質粒連接,構建pBiG-CAR真覈錶達載體.結果 經瓊脂糖凝膠電泳,穫得目的基因CAR條帶,pBlue-CAR目標條帶及pBiG-CAR目標條帶.基因測序證實所檢測重組質粒序列與pBiG-CAR序列完全一緻.結論 剋隆C57BL/6鼠CAR基因、pBlue-CAR重組質粒的構建穫得成功,併初步證實pBiG-CAR真覈錶達載體的構建穫得成功,為進一步構建可控心肌特異性CAR過錶達轉基因鼠提供基礎.
목적 구건급감정pBiG-CAR진핵표체재체.방법 제취C57BL/6태서총RNA,역전록합성cDNA,경PCR확증획득CAR기인,여쌍매절적pBlue질립련접,경전화、람백사선급측서감정pBlue-CAR재체구건성공.확증pBlue-CAR적CAR기인,경쌍매절후여pBiG질립련접,구건pBiG-CAR진핵표체재체.결과 경경지당응효전영,획득목적기인CAR조대,pBlue-CAR목표조대급pBiG-CAR목표조대.기인측서증실소검측중조질립서렬여pBiG-CAR서렬완전일치.결론 극륭C57BL/6서CAR기인、pBlue-CAR중조질립적구건획득성공,병초보증실pBiG-CAR진핵표체재체적구건획득성공,위진일보구건가공심기특이성CAR과표체전기인서제공기출.
