科技信息
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과기신식
SCIENTIFIC & TECHNICAL INFORMATION
2013年
23期
2-3
,共2页
杜星%付旭锋%张志毕%陈贵元%崔清华
杜星%付旭鋒%張誌畢%陳貴元%崔清華
두성%부욱봉%장지필%진귀원%최청화
克隆构建%Bcl-2%逆转录病毒%NIH3T3细胞
剋隆構建%Bcl-2%逆轉錄病毒%NIH3T3細胞
극륭구건%Bcl-2%역전록병독%NIH3T3세포
目的:构建pBabepuro-Bcl-2逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中建立过表达Bcl-2稳定转染细胞.方法:以人上皮细胞的cDNA为模板,利用X-tremeGENE HP(Roche)转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法在蛋白水平检测表达,利用逆转录病毒感染NIH3T3细胞.结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pBabepuro-BCl-2,蛋白水平检测证实其在293T细胞可以有效地表达,成功建立了过表达Bcl-2的NIH3T3稳定转染细胞.结论:通过构建pBabepuro表达质粒及在NIH3T3建立过表达Bcl-2稳定转染细胞,为进一步研究Bcl-2的功能调控奠定了基础.
目的:構建pBabepuro-Bcl-2逆轉錄病毒錶達質粒,鑒定錶達,在小鼠胚胎成纖維細胞NIH3T3中建立過錶達Bcl-2穩定轉染細胞.方法:以人上皮細胞的cDNA為模闆,利用X-tremeGENE HP(Roche)轉染293T細胞,蛋白質免疫印跡法在蛋白水平檢測錶達,利用逆轉錄病毒感染NIH3T3細胞.結果:成功構建瞭逆轉錄病毒錶達質粒pBabepuro-BCl-2,蛋白水平檢測證實其在293T細胞可以有效地錶達,成功建立瞭過錶達Bcl-2的NIH3T3穩定轉染細胞.結論:通過構建pBabepuro錶達質粒及在NIH3T3建立過錶達Bcl-2穩定轉染細胞,為進一步研究Bcl-2的功能調控奠定瞭基礎.
목적:구건pBabepuro-Bcl-2역전록병독표체질립,감정표체,재소서배태성섬유세포NIH3T3중건립과표체Bcl-2은정전염세포.방법:이인상피세포적cDNA위모판,이용X-tremeGENE HP(Roche)전염293T세포,단백질면역인적법재단백수평검측표체,이용역전록병독감염NIH3T3세포.결과:성공구건료역전록병독표체질립pBabepuro-BCl-2,단백수평검측증실기재293T세포가이유효지표체,성공건립료과표체Bcl-2적NIH3T3은정전염세포.결론:통과구건pBabepuro표체질립급재NIH3T3건립과표체Bcl-2은정전염세포,위진일보연구Bcl-2적공능조공전정료기출.
