中南大学学报(医学版)
中南大學學報(醫學版)
중남대학학보(의학판)
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2013年
4期
347-355
,共9页
骨髓间充质干细胞%糖尿病足%创面修复%血管内皮细胞生长因子
骨髓間充質榦細胞%糖尿病足%創麵脩複%血管內皮細胞生長因子
골수간충질간세포%당뇨병족%창면수복%혈관내피세포생장인자
bone-marrow derived mesenchymal stem cell%diabetic foot%wound healing%vascular endothelial growth factor
目的:探索骨髓间充质干细胞(bone-marrow derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)经创缘皮下和小腿肌肉移植对大鼠糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcers,DFUs)的治疗效果.方法:全骨髓贴壁法体外培养雄性Wistar大鼠BM-MSCs至第3代,经4,6-联脒-2-苯基吲哚(4,6-diamino-2-phenylindole,DAPI)标记.48只雄性Wistar大鼠随机分成A组(BM-MSCs创缘皮下移植组,n=12)、B组(BM-MSCs小腿肌肉移植组,n=12)、C组(正常大鼠对照组,n=12)和D组(DFUs对照组,n=12).大鼠糖尿病经腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导,在其双后足背切取一3 mm×7 mm矩形全层皮肤制成大鼠DFUs模型.于移植后第2,5,8,11天评估各组大鼠的创面愈合率,冰冻切片观察DAPI标记的BM-MSCs在创伤组织中的示踪,肉芽组织的厚度采用HE染色法检测,CD31和Ki-67的表达采用免疫组织化学法检测,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在创伤组织中的表达采用ELISA和RT-PCR检测.结果:C组的创面愈合最快(P<0.05),第11天B组的创面愈合率大于A组(P<0.05).第2天和第5天的冰冻切片观察发现B组的荧光强度及区域均大于A组.HE染色显示第5天B组的肉芽厚于A组.CD31的免疫组织化学显示第5天和第8天B组的小血管数目多于A组(P<0.05),而Ki-67的免疫组织化学结果显示两组无差异(P>0.05).ELISA和RT-PCR的结果均显示第8天和第11天B组的VEGF表达水平高于A组(分别P<0.05,P<0.01).结论:两种移植方式均促进了大鼠DFUs的愈合,但在愈合的后期,小腿肌肉内的移植方式体现出更好的持续性及高表达的VEGF,疗效更优.
目的:探索骨髓間充質榦細胞(bone-marrow derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)經創緣皮下和小腿肌肉移植對大鼠糖尿病足潰瘍(diabetic foot ulcers,DFUs)的治療效果.方法:全骨髓貼壁法體外培養雄性Wistar大鼠BM-MSCs至第3代,經4,6-聯脒-2-苯基吲哚(4,6-diamino-2-phenylindole,DAPI)標記.48隻雄性Wistar大鼠隨機分成A組(BM-MSCs創緣皮下移植組,n=12)、B組(BM-MSCs小腿肌肉移植組,n=12)、C組(正常大鼠對照組,n=12)和D組(DFUs對照組,n=12).大鼠糖尿病經腹腔註射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導,在其雙後足揹切取一3 mm×7 mm矩形全層皮膚製成大鼠DFUs模型.于移植後第2,5,8,11天評估各組大鼠的創麵愈閤率,冰凍切片觀察DAPI標記的BM-MSCs在創傷組織中的示蹤,肉芽組織的厚度採用HE染色法檢測,CD31和Ki-67的錶達採用免疫組織化學法檢測,血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在創傷組織中的錶達採用ELISA和RT-PCR檢測.結果:C組的創麵愈閤最快(P<0.05),第11天B組的創麵愈閤率大于A組(P<0.05).第2天和第5天的冰凍切片觀察髮現B組的熒光彊度及區域均大于A組.HE染色顯示第5天B組的肉芽厚于A組.CD31的免疫組織化學顯示第5天和第8天B組的小血管數目多于A組(P<0.05),而Ki-67的免疫組織化學結果顯示兩組無差異(P>0.05).ELISA和RT-PCR的結果均顯示第8天和第11天B組的VEGF錶達水平高于A組(分彆P<0.05,P<0.01).結論:兩種移植方式均促進瞭大鼠DFUs的愈閤,但在愈閤的後期,小腿肌肉內的移植方式體現齣更好的持續性及高錶達的VEGF,療效更優.
목적:탐색골수간충질간세포(bone-marrow derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)경창연피하화소퇴기육이식대대서당뇨병족궤양(diabetic foot ulcers,DFUs)적치료효과.방법:전골수첩벽법체외배양웅성Wistar대서BM-MSCs지제3대,경4,6-련미-2-분기신타(4,6-diamino-2-phenylindole,DAPI)표기.48지웅성Wistar대서수궤분성A조(BM-MSCs창연피하이식조,n=12)、B조(BM-MSCs소퇴기육이식조,n=12)、C조(정상대서대조조,n=12)화D조(DFUs대조조,n=12).대서당뇨병경복강주사련뇨좌균소(streptozotocin,STZ)유도,재기쌍후족배절취일3 mm×7 mm구형전층피부제성대서DFUs모형.우이식후제2,5,8,11천평고각조대서적창면유합솔,빙동절편관찰DAPI표기적BM-MSCs재창상조직중적시종,육아조직적후도채용HE염색법검측,CD31화Ki-67적표체채용면역조직화학법검측,혈관내피세포생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)재창상조직중적표체채용ELISA화RT-PCR검측.결과:C조적창면유합최쾌(P<0.05),제11천B조적창면유합솔대우A조(P<0.05).제2천화제5천적빙동절편관찰발현B조적형광강도급구역균대우A조.HE염색현시제5천B조적육아후우A조.CD31적면역조직화학현시제5천화제8천B조적소혈관수목다우A조(P<0.05),이Ki-67적면역조직화학결과현시량조무차이(P>0.05).ELISA화RT-PCR적결과균현시제8천화제11천B조적VEGF표체수평고우A조(분별P<0.05,P<0.01).결론:량충이식방식균촉진료대서DFUs적유합,단재유합적후기,소퇴기육내적이식방식체현출경호적지속성급고표체적VEGF,료효경우.