实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2013年
13期
2089-2090
,共2页
夏永仁%汤斌%罗金杰%李文斌%廖卫平
夏永仁%湯斌%囉金傑%李文斌%廖衛平
하영인%탕빈%라금걸%리문빈%료위평
Dravet综合征%SCN1A%剪接
Dravet綜閤徵%SCN1A%剪接
Dravet종합정%SCN1A%전접
目的:选取本实验室筛查SCN1A突变的Dravet综合征患者,通过生物信息学方法分析其对剪接的影响,构建迷你基因进行体外剪接分析.方法:使用Human Splicing Finder数据库预测c.1738C＞T突变对剪接的潜在影响,通过PCR方法扩增SCN1A第10、11、12、13号外显子及两端部分内含子,克隆到pTARGET真核表达载体,构建pTARGET-EXON-10-11-12-13迷你基因,以野生型pTARGET-EXON-10-11-12-13为模板构建c.1738C＞T突变体.将野生型和c.1738C＞T突变体分别转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR.结果:野生型与c.1738C＞T突变体RT-PCR产物大小都为591 bp.结论:c.1738C＞T突变不是通过对剪接的影响导致疾病发生.
目的:選取本實驗室篩查SCN1A突變的Dravet綜閤徵患者,通過生物信息學方法分析其對剪接的影響,構建迷妳基因進行體外剪接分析.方法:使用Human Splicing Finder數據庫預測c.1738C＞T突變對剪接的潛在影響,通過PCR方法擴增SCN1A第10、11、12、13號外顯子及兩耑部分內含子,剋隆到pTARGET真覈錶達載體,構建pTARGET-EXON-10-11-12-13迷妳基因,以野生型pTARGET-EXON-10-11-12-13為模闆構建c.1738C＞T突變體.將野生型和c.1738C＞T突變體分彆轉染HEK293細胞,提取總RNA進行RT-PCR.結果:野生型與c.1738C＞T突變體RT-PCR產物大小都為591 bp.結論:c.1738C＞T突變不是通過對剪接的影響導緻疾病髮生.
목적:선취본실험실사사SCN1A돌변적Dravet종합정환자,통과생물신식학방법분석기대전접적영향,구건미니기인진행체외전접분석.방법:사용Human Splicing Finder수거고예측c.1738C＞T돌변대전접적잠재영향,통과PCR방법확증SCN1A제10、11、12、13호외현자급량단부분내함자,극륭도pTARGET진핵표체재체,구건pTARGET-EXON-10-11-12-13미니기인,이야생형pTARGET-EXON-10-11-12-13위모판구건c.1738C＞T돌변체.장야생형화c.1738C＞T돌변체분별전염HEK293세포,제취총RNA진행RT-PCR.결과:야생형여c.1738C＞T돌변체RT-PCR산물대소도위591 bp.결론:c.1738C＞T돌변불시통과대전접적영향도치질병발생.
