热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2013年
5期
838-844
,共7页
高山%陈桂信%许端祥%钟开勤%林义章%潘东明
高山%陳桂信%許耑祥%鐘開勤%林義章%潘東明
고산%진계신%허단상%종개근%림의장%반동명
苦瓜%S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因%亚细胞定位%实时荧光定量PCR
苦瓜%S-腺苷蛋氨痠脫羧酶基因%亞細胞定位%實時熒光定量PCR
고과%S-선감단안산탈최매기인%아세포정위%실시형광정량PCR
Momordica charantia L%S-adenosylmethionine Decarboxylase%Subcellular localization%Quantitative PCR
根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与SAMDC基因相关的EST序列,采用3′RACE技术,克隆获得1个苦瓜SAMDC基因的cDNA全长序列,命名为McSAMDC(GenBank登录号为KC632099).生物信息分析结果表明,该cDNA全长l900bp,5′UTR和3′UTR分别长501、325bp.该cDNA序列存在3个开放读码框(微型tORF、上游读码框uORF和主读码框mORF),其中mORF长1077bp,编码358个氨基酸,预测分子量为39.31ku,含有酶原剪切位点结构域和蛋白快速降解有关的PEST二个保守结构域.二级结构分析显示,McSAMDC含有无规卷曲(45.53%)、α-螺旋(29.33%)、伸展链(19.83%)、β-转角(5.31%).序列分析结果表明,McSAMDC与拟南芥(CAA69073.1)、琴叶拟南芥(XP002882231.1)和雪里红(AAS45435.1)的氨基酸序列相似性分别达到69%、68%和68%.亚细胞定位结果表明,McSAMDC定位在细胞质中.荧光定量结果表明,McSAMDC在果实膨大期表达量最高,并随之迅速下降,并从成熟初期至完全成熟期该基因表达量逐渐增大.
根據已構建苦瓜果實均一化文庫中穫得的1箇與SAMDC基因相關的EST序列,採用3′RACE技術,剋隆穫得1箇苦瓜SAMDC基因的cDNA全長序列,命名為McSAMDC(GenBank登錄號為KC632099).生物信息分析結果錶明,該cDNA全長l900bp,5′UTR和3′UTR分彆長501、325bp.該cDNA序列存在3箇開放讀碼框(微型tORF、上遊讀碼框uORF和主讀碼框mORF),其中mORF長1077bp,編碼358箇氨基痠,預測分子量為39.31ku,含有酶原剪切位點結構域和蛋白快速降解有關的PEST二箇保守結構域.二級結構分析顯示,McSAMDC含有無規捲麯(45.53%)、α-螺鏇(29.33%)、伸展鏈(19.83%)、β-轉角(5.31%).序列分析結果錶明,McSAMDC與擬南芥(CAA69073.1)、琴葉擬南芥(XP002882231.1)和雪裏紅(AAS45435.1)的氨基痠序列相似性分彆達到69%、68%和68%.亞細胞定位結果錶明,McSAMDC定位在細胞質中.熒光定量結果錶明,McSAMDC在果實膨大期錶達量最高,併隨之迅速下降,併從成熟初期至完全成熟期該基因錶達量逐漸增大.
근거이구건고과과실균일화문고중획득적1개여SAMDC기인상관적EST서렬,채용3′RACE기술,극륭획득1개고과SAMDC기인적cDNA전장서렬,명명위McSAMDC(GenBank등록호위KC632099).생물신식분석결과표명,해cDNA전장l900bp,5′UTR화3′UTR분별장501、325bp.해cDNA서렬존재3개개방독마광(미형tORF、상유독마광uORF화주독마광mORF),기중mORF장1077bp,편마358개안기산,예측분자량위39.31ku,함유매원전절위점결구역화단백쾌속강해유관적PEST이개보수결구역.이급결구분석현시,McSAMDC함유무규권곡(45.53%)、α-라선(29.33%)、신전련(19.83%)、β-전각(5.31%).서렬분석결과표명,McSAMDC여의남개(CAA69073.1)、금협의남개(XP002882231.1)화설리홍(AAS45435.1)적안기산서렬상사성분별체도69%、68%화68%.아세포정위결과표명,McSAMDC정위재세포질중.형광정량결과표명,McSAMDC재과실팽대기표체량최고,병수지신속하강,병종성숙초기지완전성숙기해기인표체량축점증대.