淡水渔业
淡水漁業
담수어업
FRESHWATER FISHERIES
2013年
4期
69-75
,共7页
刘秋凤%曾令兵%周勇%马杰%范玉顶%张辉%李瑞伟
劉鞦鳳%曾令兵%週勇%馬傑%範玉頂%張輝%李瑞偉
류추봉%증령병%주용%마걸%범옥정%장휘%리서위
草鱼肾脏组织细胞系(CIK)%草鱼呼肠孤病毒(GCRV)%微载体%大规模培养%工艺与优化
草魚腎髒組織細胞繫(CIK)%草魚呼腸孤病毒(GCRV)%微載體%大規模培養%工藝與優化
초어신장조직세포계(CIK)%초어호장고병독(GCRV)%미재체%대규모배양%공예여우화
grass carp kidney cell line (CIK)%grass carp reovirus (GCRV)%microcarrier%large-scale culture%technique and optimization
研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化.结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0％、5％、10％、15％)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响.贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8h后细胞贴附率可达90％以上；细胞贴附期培养基中的血清浓度为5％.当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105 cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能.用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5.本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础.
研究瞭在懸浮培養繫統中使用微載體Cephodex規模化培養草魚腎髒組織細胞CIK和草魚呼腸孤病毒(GCRV)的條件併進行瞭優化.結果錶明,Cephodex是一種適閤CIK細胞貼壁生長的微載體,攪拌方式(攪拌時間/靜止時間)及血清濃度(0％、5％、10％、15％)對CIK細胞在Cephodex微載體上的貼附效率有影響.貼附期以轉速35 r/min、每靜置45 min攪拌2 min的間歇攪拌方式最佳,8h後細胞貼附率可達90％以上；細胞貼附期培養基中的血清濃度為5％.噹Cephodex微載體用量10 mg/mL、細胞初始接種密度2.5×105 cells/mL、連續攪拌速度40 r/min時可穫得最佳的細胞生長效能.用優化的最佳工藝條件大規模培養CIK細胞,接種感染複數為0.1的GCRV病毒3d後,培養細胞齣現典型細胞病變效應,病毒滴度(lgTCID50/mL)為8.5.本項研究為草魚齣血病疫苗規模化製備技術研究奠定瞭基礎.
연구료재현부배양계통중사용미재체Cephodex규모화배양초어신장조직세포CIK화초어호장고병독(GCRV)적조건병진행료우화.결과표명,Cephodex시일충괄합CIK세포첩벽생장적미재체,교반방식(교반시간/정지시간)급혈청농도(0％、5％、10％、15％)대CIK세포재Cephodex미재체상적첩부효솔유영향.첩부기이전속35 r/min、매정치45 min교반2 min적간헐교반방식최가,8h후세포첩부솔가체90％이상；세포첩부기배양기중적혈청농도위5％.당Cephodex미재체용량10 mg/mL、세포초시접충밀도2.5×105 cells/mL、련속교반속도40 r/min시가획득최가적세포생장효능.용우화적최가공예조건대규모배양CIK세포,접충감염복수위0.1적GCRV병독3d후,배양세포출현전형세포병변효응,병독적도(lgTCID50/mL)위8.5.본항연구위초어출혈병역묘규모화제비기술연구전정료기출.
