福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
9期
910-913
,共4页
李本金%尹容美%邹雪玉%王贤达%陈庆河%翁启勇
李本金%尹容美%鄒雪玉%王賢達%陳慶河%翁啟勇
리본금%윤용미%추설옥%왕현체%진경하%옹계용
黄曲霉%PCR技术%分子检测
黃麯黴%PCR技術%分子檢測
황곡매%PCR기술%분자검측
Aspergillus flavus%PCR technology%molecular detection
黄曲霉 Aspergillus f lavus 是一种广泛存在的致病真菌,早期准确检测黄曲霉并加以控制是减少黄曲霉毒素产生的有效措施。本研究利用真菌通用引物 ITS1/ITS4扩增黄曲霉转录间隔区并进行克隆测序,通过序列比对,设计1对黄曲霉特异性引物 S1/X2,由此建立的 PCR 检测体系对包括黄曲霉在内的5种曲霉菌及其他17种不同的真菌、细菌基因组 DNA 进行扩增,结果只有不同来源的黄曲霉菌株能扩增出334 bp 的特异性条带,而其余参试菌株均无扩增产物,其检测灵敏度在 DNA 水平上可达到280 fg 。该检测体系能从自然发病的花生或玉米组织中扩增到334 bp 的特异片段,实现对黄曲霉的快速可靠检测。
黃麯黴 Aspergillus f lavus 是一種廣汎存在的緻病真菌,早期準確檢測黃麯黴併加以控製是減少黃麯黴毒素產生的有效措施。本研究利用真菌通用引物 ITS1/ITS4擴增黃麯黴轉錄間隔區併進行剋隆測序,通過序列比對,設計1對黃麯黴特異性引物 S1/X2,由此建立的 PCR 檢測體繫對包括黃麯黴在內的5種麯黴菌及其他17種不同的真菌、細菌基因組 DNA 進行擴增,結果隻有不同來源的黃麯黴菌株能擴增齣334 bp 的特異性條帶,而其餘參試菌株均無擴增產物,其檢測靈敏度在 DNA 水平上可達到280 fg 。該檢測體繫能從自然髮病的花生或玉米組織中擴增到334 bp 的特異片段,實現對黃麯黴的快速可靠檢測。
황곡매 Aspergillus f lavus 시일충엄범존재적치병진균,조기준학검측황곡매병가이공제시감소황곡매독소산생적유효조시。본연구이용진균통용인물 ITS1/ITS4확증황곡매전록간격구병진행극륭측서,통과서렬비대,설계1대황곡매특이성인물 S1/X2,유차건립적 PCR 검측체계대포괄황곡매재내적5충곡매균급기타17충불동적진균、세균기인조 DNA 진행확증,결과지유불동래원적황곡매균주능확증출334 bp 적특이성조대,이기여삼시균주균무확증산물,기검측령민도재 DNA 수평상가체도280 fg 。해검측체계능종자연발병적화생혹옥미조직중확증도334 bp 적특이편단,실현대황곡매적쾌속가고검측。
Aspergillus flavus is a ubiquitous fungal pathogen in the worldwide . Early and accurate detection of A . flavus is essential to reduce the damage of Aflatoxins produced by A . flavus . Based on the difference of rDNA ITS sequences among A . flavus and other Aspergillus spp .,a pair of specific primers ,S1/X2 ,was designed in this study . The primer amplified a single 334 bp product from all isolates of A . flavus and that were not from other four Aspergillus species and 17 other fungi and bacteria isolates tested . The detection sensitivity was 280fg of genomic DNA . The PCR-based detection method developed here could also be used to detect A . flavus from naturally infected peanut or corn tissues .