解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2013年
4期
794-799
,共6页
尼美舒利%胶质瘤%U251细胞%细胞凋亡%表皮生长因子受体沉默
尼美舒利%膠質瘤%U251細胞%細胞凋亡%錶皮生長因子受體沉默
니미서리%효질류%U251세포%세포조망%표피생장인자수체침묵
nimesulide%glioma%U251 cells%cell apoptosis%silence to epidermal growth factor receptor
目的:研究尼美舒利(NIM)与表皮生长因子(EGF)受体沉默联合应用对胶质瘤U251细胞作用及机制.方法:不同浓度的尼美舒利(0、25、50、100、200、400μmol/L)与靶向EGF受体的小分子RNA(siRNA-EGFR)联合应用培养U251胶质瘤细胞,ELISA试剂盒检测培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平,MTT法检测细胞的增殖并计算抑制率,免疫印迹检测细胞增殖、凋亡和血管形成调控相关蛋白,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡.结果:siRNA-EGFR浓度小于2μg/ml联合NIM(25～400 μmol/L)处理U251细胞,其生长抑制率与NIM的浓度依赖性增高,流式检测阻滞U251细胞于G2/M期及诱导细胞凋亡,蛋白分析表明,当沉默U251细胞EGF受体时,Bax蛋白表达随尼美舒利浓度增加表达上调,而bcl-2、细胞增殖核抗原(PCNA)和促血管生成素-2(ANG-2)蛋白表达明显下调,促血管生成素-1(ANG1)表达变化不明显；siRNA-EGFR与25 μumol/L的尼美舒利处理U251胶质瘤细胞12 h后,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰,并且随尼美舒利处理时间的延长,凋亡峰增加,随处理尼美舒利剂量的增加而呈现增加趋势,各组间差异具有统计学意义.结论:当siRNA-EGFR浓度为2μg/ml以下和作用时间在48 h之前,EGF受体沉默联合尼美舒利能发挥协同作用,其机制可能与Bax蛋白表达上调和bcl-2、PCNA、VEGF、ANG-2蛋白表达明显下调有关.
目的:研究尼美舒利(NIM)與錶皮生長因子(EGF)受體沉默聯閤應用對膠質瘤U251細胞作用及機製.方法:不同濃度的尼美舒利(0、25、50、100、200、400μmol/L)與靶嚮EGF受體的小分子RNA(siRNA-EGFR)聯閤應用培養U251膠質瘤細胞,ELISA試劑盒檢測培養上清中血管內皮生長因子(VEGF)水平,MTT法檢測細胞的增殖併計算抑製率,免疫印跡檢測細胞增殖、凋亡和血管形成調控相關蛋白,流式細胞儀測定細胞週期和凋亡.結果:siRNA-EGFR濃度小于2μg/ml聯閤NIM(25～400 μmol/L)處理U251細胞,其生長抑製率與NIM的濃度依賴性增高,流式檢測阻滯U251細胞于G2/M期及誘導細胞凋亡,蛋白分析錶明,噹沉默U251細胞EGF受體時,Bax蛋白錶達隨尼美舒利濃度增加錶達上調,而bcl-2、細胞增殖覈抗原(PCNA)和促血管生成素-2(ANG-2)蛋白錶達明顯下調,促血管生成素-1(ANG1)錶達變化不明顯；siRNA-EGFR與25 μumol/L的尼美舒利處理U251膠質瘤細胞12 h後,流式細胞儀檢測齣現典型的凋亡亞二倍體峰,併且隨尼美舒利處理時間的延長,凋亡峰增加,隨處理尼美舒利劑量的增加而呈現增加趨勢,各組間差異具有統計學意義.結論:噹siRNA-EGFR濃度為2μg/ml以下和作用時間在48 h之前,EGF受體沉默聯閤尼美舒利能髮揮協同作用,其機製可能與Bax蛋白錶達上調和bcl-2、PCNA、VEGF、ANG-2蛋白錶達明顯下調有關.
목적:연구니미서리(NIM)여표피생장인자(EGF)수체침묵연합응용대효질류U251세포작용급궤제.방법:불동농도적니미서리(0、25、50、100、200、400μmol/L)여파향EGF수체적소분자RNA(siRNA-EGFR)연합응용배양U251효질류세포,ELISA시제합검측배양상청중혈관내피생장인자(VEGF)수평,MTT법검측세포적증식병계산억제솔,면역인적검측세포증식、조망화혈관형성조공상관단백,류식세포의측정세포주기화조망.결과:siRNA-EGFR농도소우2μg/ml연합NIM(25～400 μmol/L)처리U251세포,기생장억제솔여NIM적농도의뢰성증고,류식검측조체U251세포우G2/M기급유도세포조망,단백분석표명,당침묵U251세포EGF수체시,Bax단백표체수니미서리농도증가표체상조,이bcl-2、세포증식핵항원(PCNA)화촉혈관생성소-2(ANG-2)단백표체명현하조,촉혈관생성소-1(ANG1)표체변화불명현；siRNA-EGFR여25 μumol/L적니미서리처리U251효질류세포12 h후,류식세포의검측출현전형적조망아이배체봉,병차수니미서리처리시간적연장,조망봉증가,수처리니미서리제량적증가이정현증가추세,각조간차이구유통계학의의.결론:당siRNA-EGFR농도위2μg/ml이하화작용시간재48 h지전,EGF수체침묵연합니미서리능발휘협동작용,기궤제가능여Bax단백표체상조화bcl-2、PCNA、VEGF、ANG-2단백표체명현하조유관.
