棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2013年
4期
291-299
,共9页
李亚栋%默辉娟%王省芬%孙艳香%马峙英
李亞棟%默輝娟%王省芬%孫豔香%馬峙英
리아동%묵휘연%왕성분%손염향%마치영
棉花%精氨酸脱羧酶基因%多胺%黄萎病菌%基因表达
棉花%精氨痠脫羧酶基因%多胺%黃萎病菌%基因錶達
면화%정안산탈최매기인%다알%황위병균%기인표체
Gossypium hirsutum%GhADC1%polyamine%Verticillium dahliae%gene expression
以抑制性消减杂交(SSH)文库序列为基础,采用生物信息学和RT-PCR方法从陆地棉中克隆出精氨酸脱羧酶基因,命名为GhADC1,GenBank登录号为KC851856.该基因全长2954 bp,其中5’非翻译区477 bp,具有多个参与胁迫响应的顺式作用元件和一个编码8个氨基酸的微型编码序列(uORF);主编码区(mORF)2181bp,共编码726个氨基酸,其中N端具有叶绿体定位信号肽.推测的GhADC1蛋白具有PLP结合位点及Orn/Dap/Arg脱羧酶的信号位点,属于典型的Ⅲ型PLP依赖型精氨酸脱羧酶家族成员.荧光定量RT-PCR结果表明,正常条件下,GhADC1在叶片中表达量高于茎和根部组织,且在抗黄萎病品种冀棉20中的表达水平高于耐病品种中521;黄萎病菌胁迫能够快速诱导抗病品种根部GhADC1表达,而在耐病品种中未见明显差异,推测在抗病品种中GhADC1可能参与根部对黄萎病菌胁迫的早期应答.
以抑製性消減雜交(SSH)文庫序列為基礎,採用生物信息學和RT-PCR方法從陸地棉中剋隆齣精氨痠脫羧酶基因,命名為GhADC1,GenBank登錄號為KC851856.該基因全長2954 bp,其中5’非翻譯區477 bp,具有多箇參與脅迫響應的順式作用元件和一箇編碼8箇氨基痠的微型編碼序列(uORF);主編碼區(mORF)2181bp,共編碼726箇氨基痠,其中N耑具有葉綠體定位信號肽.推測的GhADC1蛋白具有PLP結閤位點及Orn/Dap/Arg脫羧酶的信號位點,屬于典型的Ⅲ型PLP依賴型精氨痠脫羧酶傢族成員.熒光定量RT-PCR結果錶明,正常條件下,GhADC1在葉片中錶達量高于莖和根部組織,且在抗黃萎病品種冀棉20中的錶達水平高于耐病品種中521;黃萎病菌脅迫能夠快速誘導抗病品種根部GhADC1錶達,而在耐病品種中未見明顯差異,推測在抗病品種中GhADC1可能參與根部對黃萎病菌脅迫的早期應答.
이억제성소감잡교(SSH)문고서렬위기출,채용생물신식학화RT-PCR방법종륙지면중극륭출정안산탈최매기인,명명위GhADC1,GenBank등록호위KC851856.해기인전장2954 bp,기중5’비번역구477 bp,구유다개삼여협박향응적순식작용원건화일개편마8개안기산적미형편마서렬(uORF);주편마구(mORF)2181bp,공편마726개안기산,기중N단구유협록체정위신호태.추측적GhADC1단백구유PLP결합위점급Orn/Dap/Arg탈최매적신호위점,속우전형적Ⅲ형PLP의뢰형정안산탈최매가족성원.형광정량RT-PCR결과표명,정상조건하,GhADC1재협편중표체량고우경화근부조직,차재항황위병품충기면20중적표체수평고우내병품충중521;황위병균협박능구쾌속유도항병품충근부GhADC1표체,이재내병품충중미견명현차이,추측재항병품충중GhADC1가능삼여근부대황위병균협박적조기응답.