中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2013年
7期
686-691
,共6页
陈雅君%王亚宾%张莉娟%张龙现%陈丽颖%刘中原%申果%胡慧
陳雅君%王亞賓%張莉娟%張龍現%陳麗穎%劉中原%申果%鬍慧
진아군%왕아빈%장리연%장룡현%진려영%류중원%신과%호혜
动物源性%肠出血性大肠杆菌O157∶H7%毒力基因%多重PCR
動物源性%腸齣血性大腸桿菌O157∶H7%毒力基因%多重PCR
동물원성%장출혈성대장간균O157∶H7%독력기인%다중PCR
animal-derived%enterohemorrhagic Escherichia coli O157 ∶ H7%virulence genes%multiplex PCR
目的 建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7及其3个主要毒力基因(hylA、eaeA和stx2基因)的多重PCR方法.方法 根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原rfbE基因、鞭毛抗原fliC基因、溶血素(hlyA)基因、紧密黏附素(eaeA)基因和志贺样毒素2(stx2)基因为靶基因,设计5对特异性引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了临床样品的检测.结果 该方法扩增目的基因片段分别为327 bp、247 bp、494 bp、384bp和779 bp,特异性和灵敏度均高,细菌纯培养物的检测灵敏度为104 cfu/mL.结论 初步建立了快速、灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157∶H7的分子流行病学调查及食品微生物检测.
目的 建立快速、特異的分離鑒定大腸桿菌O157∶H7及其3箇主要毒力基因(hylA、eaeA和stx2基因)的多重PCR方法.方法 根據GenBank公佈的大腸桿菌O157∶H7菌體抗原rfbE基因、鞭毛抗原fliC基因、溶血素(hlyA)基因、緊密黏附素(eaeA)基因和誌賀樣毒素2(stx2)基因為靶基因,設計5對特異性引物,在同一擴增體繫中進行PCR,優化反應體繫,測定特異性和靈敏度,併進行瞭臨床樣品的檢測.結果 該方法擴增目的基因片段分彆為327 bp、247 bp、494 bp、384bp和779 bp,特異性和靈敏度均高,細菌純培養物的檢測靈敏度為104 cfu/mL.結論 初步建立瞭快速、靈敏、特異的檢測腸齣血性大腸桿菌O157∶H7及其3箇毒力基因的多重PCR方法,可用于臨床動物攜帶大腸桿菌O157∶H7的分子流行病學調查及食品微生物檢測.
목적 건립쾌속、특이적분리감정대장간균O157∶H7급기3개주요독력기인(hylA、eaeA화stx2기인)적다중PCR방법.방법 근거GenBank공포적대장간균O157∶H7균체항원rfbE기인、편모항원fliC기인、용혈소(hlyA)기인、긴밀점부소(eaeA)기인화지하양독소2(stx2)기인위파기인,설계5대특이성인물,재동일확증체계중진행PCR,우화반응체계,측정특이성화령민도,병진행료림상양품적검측.결과 해방법확증목적기인편단분별위327 bp、247 bp、494 bp、384bp화779 bp,특이성화령민도균고,세균순배양물적검측령민도위104 cfu/mL.결론 초보건립료쾌속、령민、특이적검측장출혈성대장간균O157∶H7급기3개독력기인적다중PCR방법,가용우림상동물휴대대장간균O157∶H7적분자류행병학조사급식품미생물검측.
