昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2013年
7期
17-19
,共3页
王红明%唐睿珠%马丽菊%郝萍
王紅明%唐睿珠%馬麗菊%郝萍
왕홍명%당예주%마려국%학평
单克隆抗体%抗体纯化%杂交瘤细胞%有限稀释
單剋隆抗體%抗體純化%雜交瘤細胞%有限稀釋
단극륭항체%항체순화%잡교류세포%유한희석
Monoclonal antibody%Purification%Hybridoma cell%Limited dilution
目的 制备并纯化前期工作建立的杂交瘤细胞株C5所分泌的抗人肺鳞癌单克隆抗体,为研究该单抗对应肺癌相关抗原的生物学功能奠定基础.方法 常规培养前期工作建立的C5杂交瘤细胞,有限稀释法进行克隆化培养,ELISA法检测培养上清,挑选检测阳性细胞继续克隆化培养,直至3次检测亚克隆均呈阳性.收集阳性培养上清,利用Protein A-sepharoseCL-4B亲和层析法纯化抗体,Western-Blot法对纯化后的抗体进行鉴定.结果 得到了来源相同的亚克隆杂交瘤细胞株,克隆阳性率达100％.成功纯化出了目的单克隆抗体,并证实纯化产物系目的单抗,纯化后的C5杂交瘤细胞单克隆抗体重链分子量约为75 kDa.结论 成功纯化出抗人肺鳞癌单克隆抗体,该单抗可能在肺癌的早期诊断、靶向治疗和肿瘤疫苗的研制等方面具有重要意义和潜在应用价值.
目的 製備併純化前期工作建立的雜交瘤細胞株C5所分泌的抗人肺鱗癌單剋隆抗體,為研究該單抗對應肺癌相關抗原的生物學功能奠定基礎.方法 常規培養前期工作建立的C5雜交瘤細胞,有限稀釋法進行剋隆化培養,ELISA法檢測培養上清,挑選檢測暘性細胞繼續剋隆化培養,直至3次檢測亞剋隆均呈暘性.收集暘性培養上清,利用Protein A-sepharoseCL-4B親和層析法純化抗體,Western-Blot法對純化後的抗體進行鑒定.結果 得到瞭來源相同的亞剋隆雜交瘤細胞株,剋隆暘性率達100％.成功純化齣瞭目的單剋隆抗體,併證實純化產物繫目的單抗,純化後的C5雜交瘤細胞單剋隆抗體重鏈分子量約為75 kDa.結論 成功純化齣抗人肺鱗癌單剋隆抗體,該單抗可能在肺癌的早期診斷、靶嚮治療和腫瘤疫苗的研製等方麵具有重要意義和潛在應用價值.
목적 제비병순화전기공작건립적잡교류세포주C5소분비적항인폐린암단극륭항체,위연구해단항대응폐암상관항원적생물학공능전정기출.방법 상규배양전기공작건립적C5잡교류세포,유한희석법진행극륭화배양,ELISA법검측배양상청,도선검측양성세포계속극륭화배양,직지3차검측아극륭균정양성.수집양성배양상청,이용Protein A-sepharoseCL-4B친화층석법순화항체,Western-Blot법대순화후적항체진행감정.결과 득도료래원상동적아극륭잡교류세포주,극륭양성솔체100％.성공순화출료목적단극륭항체,병증실순화산물계목적단항,순화후적C5잡교류세포단극륭항체중련분자량약위75 kDa.결론 성공순화출항인폐린암단극륭항체,해단항가능재폐암적조기진단、파향치료화종류역묘적연제등방면구유중요의의화잠재응용개치.
