牡丹江医学院学报
牡丹江醫學院學報
모단강의학원학보
JOURNAL OF MUDANJIANG MEDICAL COLLEGE
2013年
4期
28-30
,共3页
孙雪荣%邓韵婷%崔红晶%郑慧玲%薛传静%荆霞%刘新光
孫雪榮%鄧韻婷%崔紅晶%鄭慧玲%薛傳靜%荊霞%劉新光
손설영%산운정%최홍정%정혜령%설전정%형하%류신광
Ism1%表达载体%基因重组%293T细胞
Ism1%錶達載體%基因重組%293T細胞
Ism1%표체재체%기인중조%293T세포
目的:构建人Ism1基因真核表达载体,并验证其在真核细胞中的表达,为相关研究奠定基础.方法:采用高保真DNA聚合酶和GC缓冲液从A549细胞扩增获取人Ism1编码序列全长,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液PCR、双酶切,及测序鉴定;用构建成功的Ism1表达载体转染293T细胞,用实时定量RT-PCR检测Ism1表达水平.结果:构建的Ism1载体经菌液PCR,双酶切鉴定后,测序结果完全正确,载体转入293T细胞后,Ism1表达量显著上升.结论:成功构建能在真核细胞中表达的人Ism1基因载体,将为相关研究提供便利.
目的:構建人Ism1基因真覈錶達載體,併驗證其在真覈細胞中的錶達,為相關研究奠定基礎.方法:採用高保真DNA聚閤酶和GC緩遲液從A549細胞擴增穫取人Ism1編碼序列全長,經酶切、連接、轉化後,挑取暘性剋隆進行菌液PCR、雙酶切,及測序鑒定;用構建成功的Ism1錶達載體轉染293T細胞,用實時定量RT-PCR檢測Ism1錶達水平.結果:構建的Ism1載體經菌液PCR,雙酶切鑒定後,測序結果完全正確,載體轉入293T細胞後,Ism1錶達量顯著上升.結論:成功構建能在真覈細胞中錶達的人Ism1基因載體,將為相關研究提供便利.
목적:구건인Ism1기인진핵표체재체,병험증기재진핵세포중적표체,위상관연구전정기출.방법:채용고보진DNA취합매화GC완충액종A549세포확증획취인Ism1편마서렬전장,경매절、련접、전화후,도취양성극륭진행균액PCR、쌍매절,급측서감정;용구건성공적Ism1표체재체전염293T세포,용실시정량RT-PCR검측Ism1표체수평.결과:구건적Ism1재체경균액PCR,쌍매절감정후,측서결과완전정학,재체전입293T세포후,Ism1표체량현저상승.결론:성공구건능재진핵세포중표체적인Ism1기인재체,장위상관연구제공편리.
