昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2013年
6期
107-112
,共6页
苏晓三%汪珺
%张蕾%金良昆%陈睿%王翼寅
囌曉三%汪珺
%張蕾%金良昆%陳睿%王翼寅
소효삼%왕군
%장뢰%금량곤%진예%왕익인
免疫疗法%过继%细胞分离%肿瘤%体外
免疫療法%過繼%細胞分離%腫瘤%體外
면역요법%과계%세포분리%종류%체외
目的 比较两种外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs) 采集方法 诱导的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK) 扩增效率、细胞表型、杀伤肿瘤细胞的活性及其回输至肿瘤患者体内的免疫调节作用.方法 12例肿瘤患者共进行36次CIK 细胞体外诱导、扩增,其中6 例患者共18次扩增采用血细胞分离机采集PBMCs,另外6 例患者共18 次培养采用Ficoll 密度梯度分离50 mL 外周血方法 采集PBMCs.结果采用血细胞分离机或Ficoll 分离法采集PBMCs 经体外诱导获得CIK(分别为A-CIK 和F-CIK) 细胞数分别为7.47×109(3.7-13.6×109) 和6.37×109(3.8-11.8×109).培养至14 d 时,> 90%的A-CIK 和F-CIK细胞表型为CD3+,其中CD3+ CD56+,NKG2D+细胞及细胞内TH1 细胞因子均显著升高.效靶比为60:1 时,A-CIK和F-CIK 细胞对Daudi、K562 及293的杀伤活性分别为(49.1±17.8) %和(55.3±11.5) %、(67.6±24.1 %和(58.1±17.6) %、(36.4±11 %和(33.7±14.8) %.给肿瘤患者回输自体A-CIK 或F-CIK 细胞14 d 后,外周血中CD3+、CD8+及CD3+、CD56+细胞以及PBMCs 内IFN-γ均显著升高.结论 采集肿瘤患者50 mL 外周血分离的PBMCs 足以制备临床治疗使用的CIK 细胞.
目的 比較兩種外週血單箇覈細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs) 採集方法 誘導的細胞因子誘導殺傷細胞(cytokine-induced killer,CIK) 擴增效率、細胞錶型、殺傷腫瘤細胞的活性及其迴輸至腫瘤患者體內的免疫調節作用.方法 12例腫瘤患者共進行36次CIK 細胞體外誘導、擴增,其中6 例患者共18次擴增採用血細胞分離機採集PBMCs,另外6 例患者共18 次培養採用Ficoll 密度梯度分離50 mL 外週血方法 採集PBMCs.結果採用血細胞分離機或Ficoll 分離法採集PBMCs 經體外誘導穫得CIK(分彆為A-CIK 和F-CIK) 細胞數分彆為7.47×109(3.7-13.6×109) 和6.37×109(3.8-11.8×109).培養至14 d 時,> 90%的A-CIK 和F-CIK細胞錶型為CD3+,其中CD3+ CD56+,NKG2D+細胞及細胞內TH1 細胞因子均顯著升高.效靶比為60:1 時,A-CIK和F-CIK 細胞對Daudi、K562 及293的殺傷活性分彆為(49.1±17.8) %和(55.3±11.5) %、(67.6±24.1 %和(58.1±17.6) %、(36.4±11 %和(33.7±14.8) %.給腫瘤患者迴輸自體A-CIK 或F-CIK 細胞14 d 後,外週血中CD3+、CD8+及CD3+、CD56+細胞以及PBMCs 內IFN-γ均顯著升高.結論 採集腫瘤患者50 mL 外週血分離的PBMCs 足以製備臨床治療使用的CIK 細胞.
목적 비교량충외주혈단개핵세포(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs) 채집방법 유도적세포인자유도살상세포(cytokine-induced killer,CIK) 확증효솔、세포표형、살상종류세포적활성급기회수지종류환자체내적면역조절작용.방법 12례종류환자공진행36차CIK 세포체외유도、확증,기중6 례환자공18차확증채용혈세포분리궤채집PBMCs,령외6 례환자공18 차배양채용Ficoll 밀도제도분리50 mL 외주혈방법 채집PBMCs.결과채용혈세포분리궤혹Ficoll 분리법채집PBMCs 경체외유도획득CIK(분별위A-CIK 화F-CIK) 세포수분별위7.47×109(3.7-13.6×109) 화6.37×109(3.8-11.8×109).배양지14 d 시,> 90%적A-CIK 화F-CIK세포표형위CD3+,기중CD3+ CD56+,NKG2D+세포급세포내TH1 세포인자균현저승고.효파비위60:1 시,A-CIK화F-CIK 세포대Daudi、K562 급293적살상활성분별위(49.1±17.8) %화(55.3±11.5) %、(67.6±24.1 %화(58.1±17.6) %、(36.4±11 %화(33.7±14.8) %.급종류환자회수자체A-CIK 혹F-CIK 세포14 d 후,외주혈중CD3+、CD8+급CD3+、CD56+세포이급PBMCs 내IFN-γ균현저승고.결론 채집종류환자50 mL 외주혈분리적PBMCs 족이제비림상치료사용적CIK 세포.
