中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
7期
745-749
,共5页
杨子善%谢云飞%解博红%任太芳%王永淑%丰慧根%刘世饶%马振玲
楊子善%謝雲飛%解博紅%任太芳%王永淑%豐慧根%劉世饒%馬振玲
양자선%사운비%해박홍%임태방%왕영숙%봉혜근%류세요%마진령
ANKIB1%单克隆抗体%表达%RBR结构域
ANKIB1%單剋隆抗體%錶達%RBR結構域
ANKIB1%단극륭항체%표체%RBR결구역
目的:制备抗人ANKIB1的小鼠单克隆抗体.方法:PCR扩增人ANKIB1(1-480)的编码序列,构建pGEX-5X-ANKIB1(1-480)表达载体.在大肠杆菌中诱导表达GST-ANKIB1(1-480),利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化重组蛋白.使用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western blot和免疫沉淀实验鉴定抗体,并检测ANKIB1在哺乳动物细胞中的表达.结果:获得了一株杂交瘤细胞株(7A9),所分泌的抗体对人、大鼠和小鼠ANKIB1均具有很高的灵敏性和特异性.ANKIB1在哺乳动物细胞中高表达.结论:成功制备了抗ANKIB1的单克隆抗体,ANKIB1在人、大鼠和小鼠脑以及人胚肾细胞293ET中均有较高水平的表达.
目的:製備抗人ANKIB1的小鼠單剋隆抗體.方法:PCR擴增人ANKIB1(1-480)的編碼序列,構建pGEX-5X-ANKIB1(1-480)錶達載體.在大腸桿菌中誘導錶達GST-ANKIB1(1-480),利用穀胱甘肽瓊脂糖凝膠純化重組蛋白.使用純化蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,篩選雜交瘤細胞株,通過ELISA、Western blot和免疫沉澱實驗鑒定抗體,併檢測ANKIB1在哺乳動物細胞中的錶達.結果:穫得瞭一株雜交瘤細胞株(7A9),所分泌的抗體對人、大鼠和小鼠ANKIB1均具有很高的靈敏性和特異性.ANKIB1在哺乳動物細胞中高錶達.結論:成功製備瞭抗ANKIB1的單剋隆抗體,ANKIB1在人、大鼠和小鼠腦以及人胚腎細胞293ET中均有較高水平的錶達.
목적:제비항인ANKIB1적소서단극륭항체.방법:PCR확증인ANKIB1(1-480)적편마서렬,구건pGEX-5X-ANKIB1(1-480)표체재체.재대장간균중유도표체GST-ANKIB1(1-480),이용곡광감태경지당응효순화중조단백.사용순화단백면역BALB/c소서,취기비세포여SP2/0골수류세포융합,사선잡교류세포주,통과ELISA、Western blot화면역침정실험감정항체,병검측ANKIB1재포유동물세포중적표체.결과:획득료일주잡교류세포주(7A9),소분비적항체대인、대서화소서ANKIB1균구유흔고적령민성화특이성.ANKIB1재포유동물세포중고표체.결론:성공제비료항ANKIB1적단극륭항체,ANKIB1재인、대서화소서뇌이급인배신세포293ET중균유교고수평적표체.
