中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
7期
736-740
,共5页
狂犬病毒%细胞表位%MHC限制性
狂犬病毒%細胞錶位%MHC限製性
광견병독%세포표위%MHC한제성
目的:预测并筛选鉴定狂犬病毒糖蛋白及核蛋白BALB/c小鼠MHC限制性CTL和Th表位.方法:从NCBI数据库中获取狂犬病毒糖蛋白及核蛋白的完整氨基酸序列,然后运用生物信息学软件BIMAS、SYFPEITHI和RANKPEP对CTL表位及Th表位进行预测并合成相关抗原表位.BALB/c小鼠经狂犬疫苗免疫后,通过淋巴细胞增殖实验对预测的多肽进行初步筛选.初步筛选的多肽再利用ELISPOT和流式细胞法进行进一步筛选,检测指标主要包括细胞因子IFN-γ和IL-4的分泌水平以及多肽对CD3+CD4+/ CD3+CD8+T细胞亚群的影响情况.结果:经软件预测获得8条可能的CTL与Th表位,多肽合成后经分析各条多肽纯度大于90%.实验验证后证明2条多肽G367-381及G333-341能够成为细胞表位,其中G367-381作为Th表位,G333-341作为CTL表位.结论:G367-381及G333-341是狂犬病毒的细胞表位,可用于未来狂犬病毒表位疫苗的研究.
目的:預測併篩選鑒定狂犬病毒糖蛋白及覈蛋白BALB/c小鼠MHC限製性CTL和Th錶位.方法:從NCBI數據庫中穫取狂犬病毒糖蛋白及覈蛋白的完整氨基痠序列,然後運用生物信息學軟件BIMAS、SYFPEITHI和RANKPEP對CTL錶位及Th錶位進行預測併閤成相關抗原錶位.BALB/c小鼠經狂犬疫苗免疫後,通過淋巴細胞增殖實驗對預測的多肽進行初步篩選.初步篩選的多肽再利用ELISPOT和流式細胞法進行進一步篩選,檢測指標主要包括細胞因子IFN-γ和IL-4的分泌水平以及多肽對CD3+CD4+/ CD3+CD8+T細胞亞群的影響情況.結果:經軟件預測穫得8條可能的CTL與Th錶位,多肽閤成後經分析各條多肽純度大于90%.實驗驗證後證明2條多肽G367-381及G333-341能夠成為細胞錶位,其中G367-381作為Th錶位,G333-341作為CTL錶位.結論:G367-381及G333-341是狂犬病毒的細胞錶位,可用于未來狂犬病毒錶位疫苗的研究.
목적:예측병사선감정광견병독당단백급핵단백BALB/c소서MHC한제성CTL화Th표위.방법:종NCBI수거고중획취광견병독당단백급핵단백적완정안기산서렬,연후운용생물신식학연건BIMAS、SYFPEITHI화RANKPEP대CTL표위급Th표위진행예측병합성상관항원표위.BALB/c소서경광견역묘면역후,통과림파세포증식실험대예측적다태진행초보사선.초보사선적다태재이용ELISPOT화류식세포법진행진일보사선,검측지표주요포괄세포인자IFN-γ화IL-4적분비수평이급다태대CD3+CD4+/ CD3+CD8+T세포아군적영향정황.결과:경연건예측획득8조가능적CTL여Th표위,다태합성후경분석각조다태순도대우90%.실험험증후증명2조다태G367-381급G333-341능구성위세포표위,기중G367-381작위Th표위,G333-341작위CTL표위.결론:G367-381급G333-341시광견병독적세포표위,가용우미래광견병독표위역묘적연구.
