中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
7期
689-693
,共5页
白福良%田辉%牛泽杉%于引航%王文飞%周兵%李德山
白福良%田輝%牛澤杉%于引航%王文飛%週兵%李德山
백복량%전휘%우택삼%우인항%왕문비%주병%리덕산
rpSUMOhIL-15%融合蛋白%T细胞增殖%NK细胞杀伤活性%抑制肿瘤作用
rpSUMOhIL-15%融閤蛋白%T細胞增殖%NK細胞殺傷活性%抑製腫瘤作用
rpSUMOhIL-15%융합단백%T세포증식%NK세포살상활성%억제종류작용
目的:探讨重组人白细胞介素15(rhIL-15)的表达条件、纯化工艺并进行生物活性鉴定.方法:采用RT-PCR方法从正常成人外周血淋巴细胞中扩增出人白细胞介素15(hIL-15) cDNA,克隆到pSUMO Vector中,构建rpSUMOhIL-15重组质粒.将转化重组质粒的工程菌诱导表达,超声破碎后取菌液上清,经过亲和层析、酶切、亲和层析得到成熟蛋白.高效液相色谱进行纯度分析;利用rhIL-15促进T细胞增殖、rhIL-15诱生的NK细胞杀伤肿瘤细胞的能力鉴定其生物活性;荷瘤鼠实验研究rhIL-15抗肿瘤作用.结果:经纯化后得到rhIL-15,其分子量大小为14.4 kD,蛋白纯度在95%以上,具有显著刺激T细胞增殖和NK细胞杀伤肿瘤细胞效果.动物实验结果显示其具有明显的抗肿瘤作用.结论:经过纯化获得高纯度和高生物学活性的rhIL-15,且具有明显增强NK细胞杀伤、刺激T细胞增殖和抗肿瘤的活性,为细胞因子联合其他方法治疗肿瘤等疾病提供了实验基础.
目的:探討重組人白細胞介素15(rhIL-15)的錶達條件、純化工藝併進行生物活性鑒定.方法:採用RT-PCR方法從正常成人外週血淋巴細胞中擴增齣人白細胞介素15(hIL-15) cDNA,剋隆到pSUMO Vector中,構建rpSUMOhIL-15重組質粒.將轉化重組質粒的工程菌誘導錶達,超聲破碎後取菌液上清,經過親和層析、酶切、親和層析得到成熟蛋白.高效液相色譜進行純度分析;利用rhIL-15促進T細胞增殖、rhIL-15誘生的NK細胞殺傷腫瘤細胞的能力鑒定其生物活性;荷瘤鼠實驗研究rhIL-15抗腫瘤作用.結果:經純化後得到rhIL-15,其分子量大小為14.4 kD,蛋白純度在95%以上,具有顯著刺激T細胞增殖和NK細胞殺傷腫瘤細胞效果.動物實驗結果顯示其具有明顯的抗腫瘤作用.結論:經過純化穫得高純度和高生物學活性的rhIL-15,且具有明顯增彊NK細胞殺傷、刺激T細胞增殖和抗腫瘤的活性,為細胞因子聯閤其他方法治療腫瘤等疾病提供瞭實驗基礎.
목적:탐토중조인백세포개소15(rhIL-15)적표체조건、순화공예병진행생물활성감정.방법:채용RT-PCR방법종정상성인외주혈림파세포중확증출인백세포개소15(hIL-15) cDNA,극륭도pSUMO Vector중,구건rpSUMOhIL-15중조질립.장전화중조질립적공정균유도표체,초성파쇄후취균액상청,경과친화층석、매절、친화층석득도성숙단백.고효액상색보진행순도분석;이용rhIL-15촉진T세포증식、rhIL-15유생적NK세포살상종류세포적능력감정기생물활성;하류서실험연구rhIL-15항종류작용.결과:경순화후득도rhIL-15,기분자량대소위14.4 kD,단백순도재95%이상,구유현저자격T세포증식화NK세포살상종류세포효과.동물실험결과현시기구유명현적항종류작용.결론:경과순화획득고순도화고생물학활성적rhIL-15,차구유명현증강NK세포살상、자격T세포증식화항종류적활성,위세포인자연합기타방법치료종류등질병제공료실험기출.
