CAJ | 학술논문

目的:用外源性血小板衍生生长因子-D抗体(Platelet-derived growth factor D antibody,PDGF-DAb)体外刺激外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),观察其对破骨前体细胞分化过程的影响.方法:采集血并分离单个核细胞,将所得细胞分为三组:诱导组(PDGF-D+PBMCs)、阻断组(PDGF-D+PDGF-D Ab)和对照组(细胞培养基+PBMCs).于第15天应用抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色和骨吸收实验观察破骨样细胞(Osteoclast like cells,OLCs)的分化及活性;Real-time PCR检测OLCs标志基因TRAP、Cathepsin K、MMP-9(Matrix metalloproteinases 9) mRNA的表达;Western blot检测各组细胞中Cathepsin K蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞上清液中MMP-9的表达.结果:TRAP染色和骨吸收实验见诱导组有大量具有骨吸收功能的OLCs,而阻断组和对照组均未见.阻断组和对照组TRAP、Cathepsin K、MMP-9 mRNA的相对表达量均显著低于诱导组(P＜0.05),且二组间无显著差异(P＞0.05).对照组和阻断组中Cathepsin K蛋白(Western blot检测)和MMP-9(ELISA检测)表达均低于诱导组(P＜0.05),且两组间无显著差异(P＞0.05).结论:外源性PDGF-D抗体可阻断由PDGF-D诱导的PBMCs向OLCs分化过程.
목적:용외원성혈소판연생생장인자-D항체(Platelet-derived growth factor D antibody,PDGF-DAb)체외자격외주혈단핵세포(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),관찰기대파골전체세포분화과정적영향.방법:채집혈병분리단개핵세포,장소득세포분위삼조:유도조(PDGF-D+PBMCs)、조단조(PDGF-D+PDGF-D Ab)화대조조(세포배양기+PBMCs).우제15천응용항주석산산성린산매(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)염색화골흡수실험관찰파골양세포(Osteoclast like cells,OLCs)적분화급활성;Real-time PCR검측OLCs표지기인TRAP、Cathepsin K、MMP-9(Matrix metalloproteinases 9) mRNA적표체;Western blot검측각조세포중Cathepsin K단백적표체;매련면역흡부시험(ELISA)검측각조세포상청액중MMP-9적표체.결과:TRAP염색화골흡수실험견유도조유대량구유골흡수공능적OLCs,이조단조화대조조균미견.조단조화대조조TRAP、Cathepsin K、MMP-9 mRNA적상대표체량균현저저우유도조(P＜0.05),차이조간무현저차이(P＞0.05).대조조화조단조중Cathepsin K단백(Western blot검측)화MMP-9(ELISA검측)표체균저우유도조(P＜0.05),차량조간무현저차이(P＞0.05).결론:외원성PDGF-D항체가조단유PDGF-D유도적PBMCs향OLCs분화과정.