中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2013年
8期
1375-1379
,共5页
张红梅%赵丹%吴玫%牟旭鹏%周伯平
張紅梅%趙丹%吳玫%牟旭鵬%週伯平
장홍매%조단%오매%모욱붕%주백평
禽流感病毒%骨髓%低致病性%受体%植物凝集素
禽流感病毒%骨髓%低緻病性%受體%植物凝集素
금류감병독%골수%저치병성%수체%식물응집소
目的 选择代表不同骨髓细胞分化阶段的血液肿瘤细胞株K-562、HL-60作为研究对象,选取低致病性禽流感病毒H3N2/H4N6作为病原体,探讨禽流感病毒感染骨髓的机制.方法 应用流式细胞术检测K562等细胞表面禽流感病毒受体;收集感染病毒的细胞培养上清,红细胞凝集实验检测染毒细胞释放的子代病毒;收集感染病毒的细胞免疫荧光检测病毒NP,判断病毒吸附、进入细胞并在细胞内增殖、复制情况.结果所检测细胞表面均有禽流感病毒SAα2,3-Gal和SAα2,6-Gal连接的唾液酸寡糖受体的表达.在H3N2感染的K-562细胞培养上清中检测到病毒HA,且随培养时间的延长,病毒的血凝滴度增大.在H4N6感染的K-562细胞的培养上清中病毒HA检测阳性,第三天,K-562细胞上清的病毒血凝滴度即达4,第四天达16;HL-60细胞,只在第三、四天达2;随后荧光显微镜下观察可见,染毒细胞培养0 h时,胞膜、胞浆内即可见病毒分布,H4N6感染的细胞荧光强度大于H3N2感染的细胞;H3N2和H4N6感染的细胞中,K562细胞的荧光强度大于其他细胞.随着培养时间的延长,K562细胞表面的病毒增多,而HL-60细胞无明显变化.结论 K-562、HL-60细胞表面均表达禽流感病毒SA-α2,3Gal和SA-α2,6Gal连接的唾液酸寡糖受体.同一病毒H3N2或H4N6的吸附、繁殖和复制及释放情况存在较大差异.
目的 選擇代錶不同骨髓細胞分化階段的血液腫瘤細胞株K-562、HL-60作為研究對象,選取低緻病性禽流感病毒H3N2/H4N6作為病原體,探討禽流感病毒感染骨髓的機製.方法 應用流式細胞術檢測K562等細胞錶麵禽流感病毒受體;收集感染病毒的細胞培養上清,紅細胞凝集實驗檢測染毒細胞釋放的子代病毒;收集感染病毒的細胞免疫熒光檢測病毒NP,判斷病毒吸附、進入細胞併在細胞內增殖、複製情況.結果所檢測細胞錶麵均有禽流感病毒SAα2,3-Gal和SAα2,6-Gal連接的唾液痠寡糖受體的錶達.在H3N2感染的K-562細胞培養上清中檢測到病毒HA,且隨培養時間的延長,病毒的血凝滴度增大.在H4N6感染的K-562細胞的培養上清中病毒HA檢測暘性,第三天,K-562細胞上清的病毒血凝滴度即達4,第四天達16;HL-60細胞,隻在第三、四天達2;隨後熒光顯微鏡下觀察可見,染毒細胞培養0 h時,胞膜、胞漿內即可見病毒分佈,H4N6感染的細胞熒光彊度大于H3N2感染的細胞;H3N2和H4N6感染的細胞中,K562細胞的熒光彊度大于其他細胞.隨著培養時間的延長,K562細胞錶麵的病毒增多,而HL-60細胞無明顯變化.結論 K-562、HL-60細胞錶麵均錶達禽流感病毒SA-α2,3Gal和SA-α2,6Gal連接的唾液痠寡糖受體.同一病毒H3N2或H4N6的吸附、繁殖和複製及釋放情況存在較大差異.
목적 선택대표불동골수세포분화계단적혈액종류세포주K-562、HL-60작위연구대상,선취저치병성금류감병독H3N2/H4N6작위병원체,탐토금류감병독감염골수적궤제.방법 응용류식세포술검측K562등세포표면금류감병독수체;수집감염병독적세포배양상청,홍세포응집실험검측염독세포석방적자대병독;수집감염병독적세포면역형광검측병독NP,판단병독흡부、진입세포병재세포내증식、복제정황.결과소검측세포표면균유금류감병독SAα2,3-Gal화SAα2,6-Gal련접적타액산과당수체적표체.재H3N2감염적K-562세포배양상청중검측도병독HA,차수배양시간적연장,병독적혈응적도증대.재H4N6감염적K-562세포적배양상청중병독HA검측양성,제삼천,K-562세포상청적병독혈응적도즉체4,제사천체16;HL-60세포,지재제삼、사천체2;수후형광현미경하관찰가견,염독세포배양0 h시,포막、포장내즉가견병독분포,H4N6감염적세포형광강도대우H3N2감염적세포;H3N2화H4N6감염적세포중,K562세포적형광강도대우기타세포.수착배양시간적연장,K562세포표면적병독증다,이HL-60세포무명현변화.결론 K-562、HL-60세포표면균표체금류감병독SA-α2,3Gal화SA-α2,6Gal련접적타액산과당수체.동일병독H3N2혹H4N6적흡부、번식화복제급석방정황존재교대차이.
